[发明专利]卡马西平的检测方法

说明书

本发明提供了卡马西平的检测方法，包括：制备至少三种浓度的标准溶液，其中，标准溶液为具有卡马西平和内标物的溶液；利用液相色谱质谱联用仪在预设的检测条件下分别检测每种标准溶液，获得每种标准溶液对应的第一检测结果；根据各个第一检测结果、标准溶液中的卡马西平和内标物的浓度，拟合卡马西平的标准曲线方程；对待处理样品进行预处理，得到第一上清液；向第一上清液内加入沉淀蛋白试剂和内标物，涡旋混合并高速离心，取离心后的第二上清液作为待测样品；利用液相色谱质谱联用仪在检测条件下检测待测样品，获得待测样品的第二检测结果；基于标准曲线方程和第二检测结果，得到待测样品中卡马西平的浓度。本方案能够缩短样品检测时间。

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域，特别涉及卡马西平的检测方法。

背景技术

卡马西平可以依赖性地阻滞各种可兴奋细胞膜的Na+通道，故能明显抑制异常高频放电的发生和扩散；还可以抑制T-型钙通道，增强中枢的去甲肾上腺素能神经的活性，以及促进抗利尿激素的分泌或提高效应器对抗利尿激素的敏感性。

目前，检测样品中卡马西平含量通常采用的方法为高效液相色谱法。而高效液相色谱法检测卡马西平通常需要对待测样品进行较复杂的前处理，耗费时间较多，从而导致样品检测时间较长。

发明内容

本发明提供了卡马西平的检测方法，能够缩短样品检测时间。

为了解决上述问题，本发明实施例提供了卡马西平的检测方法，包括：

制备至少三种浓度的标准溶液，其中，所述标准溶液为具有卡马西平和内标物的溶液；

利用液相色谱质谱联用仪在预设的检测条件下分别检测每一种所述标准溶液，获得每一种所述标准溶液对应的第一检测结果；根据各个所述第一检测结果、所述标准溶液中的卡马西平和内标物的浓度，拟合卡马西平的标准曲线方程；对待处理样品进行预处理，得到第一上清液；向所述第一上清液内加入沉淀蛋白试剂和内标物，涡旋混合，并高速离心，取离心后的第二上清液作为待测样品；利用液相色谱质谱联用仪在所述检测条件下检测所述待测样品，获得所述待测样品的第二检测结果；基于所述标准曲线方程和所述第二检测结果，得到所述待测样品中卡马西平的浓度。

具体地，为了降低卡马西平的标准曲线方程的计算难度，同时，为了降低标准溶液的制备难度，各种浓度的标准溶液中的内标物的量相同。

需要说明的是，第一上清液为血清或血浆。

具体地，可以通过下述步骤制备标准溶液：

(1)标准工作液的配制

精确称取卡马西平标准品置于容量瓶，用稀释液进行溶解，并定容于容量瓶的标线，得到标准储备液，用稀释液进行稀释，得到至少三种不同浓度的卡马西平标准工作液，并于-80℃保存，有效期12个月。

(2)内标工作液的配制

将内标物溶于稀释液中，得到标准内标储备液，并于-80℃保存，有效期12个月。移去适量标准内标储备液，用稀释液进行稀释得到内标工作液，并于-80℃保存，有效期12个月。

(3)标准溶液的标定

移取步骤(1)中的至少三种标准工作液和步骤(2)中的内标工作液以及稀释液，并置于离心管中制成至少三种混合溶液，将上述混合溶液分别在转速1000-2000rpm下涡旋混匀30s-1min后，得到至少三种标准溶液。

优选地，所述检测条件中的液相条件包括：当洗脱流动相的有机相为甲醇溶液、水相为蒸馏水时，所述有机相含有0-0.5％的甲酸，所述水相均含有0-0.5％的甲酸；柱温为18-40℃；流速为0.2-0.5mL/min。