[发明专利]一种桔霉素含量的检测方法

权利要求书

1.一种桔霉素含量的测定方法，其特征在于：采用外标法测定桔霉素的含量，步骤如下：（1）配置一定浓度梯度的桔霉素标准溶液，用液相色谱绘制浓度-峰面积的标准曲线；（2）将样品溶液过0.22μm滤膜后采用液相色谱法进行测定，并根据（1）中的标准曲线计算浓度；

步骤（1）和（2）中所述液相色谱的条件为：色谱柱：4.6×250mm、5μ的Agilent ZorbaxSB-C18，激发波长331nm，发射波长500nm，进样量20μL，流速1.0mL/min，检测时间15min，流动相：A相为100%甲醇，B相为同时含有0.02%体积分数的三乙胺、0.32%体积分数的四氢呋喃和0.1%体积分数的磷酸的水溶液，C相为含有0.1%体积分数的甲酸的乙腈，流动相的洗脱梯度为：0~7min，30%B+70%C；7~10min，A液由0%增加至30%，B液由30%减少至0%，C液保持70%；10~12min，A液由30%减少至0%，B液由0%增加至30%，C液保持70%；12~15min，30%B+70%C；

所述桔霉素标准溶液的配置方法：在电子分析天平中准确称取1mg桔霉素，加入10mL75%体积分数的乙醇充分溶解，配置成100μg/mL桔霉素储备液，分装成10管，取其中一管用75%体积分数的乙醇分别稀释成1000ng/mL、500ng/mL、250ng/mL、100ng/mL、50ng/mL、25ng/mL的桔霉素标准溶液，其余储备液于-80℃冻存，桔霉素标准溶液现配现用，桔霉素储备液能保藏1年；

所述样品溶液为红曲霉发酵液、红曲提取液、麦曲黄酒或红曲黄酒中的一种。