[发明专利]一种马铃薯黑胫病抗性的鉴定方法

权利要求书

1.一种马铃薯黑胫病抗性的鉴定方法，包括：

准备悬浮液提供一种浓度为10³CFU/mL的马铃薯黑胫病病原菌悬浮液；

筛选待测叶柄选择有10片完全展开的叶片的马铃薯植株，选取所述马铃薯植株第4-6片成熟健康叶的叶柄作为待测叶柄，该待测叶柄的长度为L₀；

接种观察将所述马铃薯黑胫病病原菌悬浮液倒入组培瓶中；将待测叶柄插入干燥花泥中，并置于盛有所述马铃薯黑胫病病原菌悬浮液的所述组培瓶，盖上瓶盖后放入24-26℃、16h光/8h暗的光照培养箱进行培养观察；

抗性鉴定利用灯箱和白炽灯观察并记录所述待测叶柄的软化水渍化症状，测量所述待测叶柄的水渍化病变长度，以所述待测叶柄接种培养36h后的病变长度作为叶柄最终病变长度L_病，按照分级标准进行病害分级并计算病情指数；依据所述病情指数对马铃薯黑胫病抗性进行评价鉴定：病情指数≤0.2属于抗性，0.2＜病情指数≤0.4属于中抗，0.4＜病情指数≤0.6属于感病，0.8＜病情指数属于易感；其中，病情指数的计算公式如下：

所述病害分级标准如下：

0≤病变长度L_病＜0.08L₀，病害等级设置为0级；

0.08L₀≤病变长度L_病＜0.15L₀，病害等级设置为1级；

0.15L₀≤病变长度L_病＜0.3L₀，病害等级设置为2级；

0.3L₀≤病变长度L_病＜0.6L₀，病害等级设置为3级；

0.6L₀≤病变长度L_病＜L₀，病害等级设置为4级。

2.根据权利要求1所述的马铃薯黑胫病抗性的鉴定方法，其特征在于，所述筛选待测叶柄的步骤包括：选择定植后生长5-6周的马铃薯植株或者选自采用块茎种植且出芽后生长3-4周的马铃薯植株，所述马铃薯植株有10片完全展开的叶片，取第4-6片成熟健康叶的叶柄，并切去叶柄周围多余的叶片，并将叶柄切至统一长度L₀以作为所述待测叶柄。

3.根据权利要求2所述的马铃薯黑胫病抗性的鉴定方法，其特征在于，所述待测叶柄的长度L₀为4-6.5cm。

4.根据权利要求1或2或3所述的马铃薯黑胫病抗性的鉴定方法，其特征在于，所述接种培养的步骤包括：将所述马铃薯黑胫病病原菌悬浮液置于所述组培瓶中；先将具有相同遗传背景的待测材料的若干株所述待测叶柄插入干燥花泥中，再置于盛有所述马铃薯黑胫病病原菌悬浮液的所述组培瓶中，盖上所述组培瓶的瓶盖；将盖上所述瓶盖的组培瓶放入25℃，16h光/8h暗的光照培养箱进行培养观察。

5.根据权利要求4所述的马铃薯黑胫病抗性的鉴定方法，其特征在于，置于同一组培瓶中的待测叶柄有3-6株。

6.根据权利要求5所述的马铃薯黑胫病抗性的鉴定方法，其特征在于，所述抗性鉴定的步骤包括：每间隔相同时间，利用光源照射所述光照培养箱中的组培瓶，用肉眼观察叶柄软化水渍化症状，用尺子测量叶柄水渍化病变长度并拍照记录，以所述待测叶柄接种培养36h的病变长度作为最终病变长度L_病，按照所述病害分级标准进行分级并计算所述病情指数，依据所述病情指数对马铃薯黑胫病抗性进行评价鉴定。