[发明专利]SNHG9基因在细胞机械应力检测中的应用及试剂盒有效
申请号: | 202011013561.7 | 申请日: | 2020-09-24 |
公开(公告)号: | CN112322746B | 公开(公告)日: | 2022-03-18 |
发明(设计)人: | 林爱福;李俊宏;李瑞花 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人: | 黄美娟;李世玉 |
地址: | 310027 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | snhg9 基因 细胞 机械 应力 检测 中的 应用 试剂盒 | ||
1.一种SNHG9基因在细胞机械应力检测中的应用,其特征在于所述应用是采用PCR检测待测细胞中SNHG9基因表达量,若相比正常细胞的SNHG9基因表达量升高,则待测细胞机械应力水平升高。
2.如权利要求1所述的应用,其特征在于所述待测细胞为人乳腺癌细胞MDA-MB-231。
3.一种用于权利要求1所述应用的PCR检测试剂盒,其特征在于所述试剂盒包括SNHG9基因检测引物、内参基因B2M引物;
所述SNHG9基因检测引物为SNHG9F#1+SNHG9R#1、SNHG9F#2+SNHG9R#2,SNHG9F#3+SNHG9R#3中的一组,其序列如下:
SNHG9 F#1:CTACGTCACCCGAAAAGCGA;
SNHG9 R#1:CGCGGACGTTTATAGCCACT;
SNHG9 F#2:TAGGACACTGGTCCTCCCAC;
SNHG9 R#2:CAGCCAAGTTCCCCCAACC;
SNHG9 F#3:GGGAATCTACGTCACCCGAA;
SNHG9 R#3:CACTCTTCGGGTGGATTCCC;
所述内参引物B2M F:AGATGAGTATGCCTGCCGTG;B2M R:TCATCCAATCCAAATGCGGC。
4.如权利要求3所述的PCR检测试剂盒,其特征在于所述PCR检测试剂盒还包括PCR反应液,所述反应液包括SYBR Premix Ex TaqTM、双蒸水、cDNA模板。
5.如权利要求3所述的PCR检测试剂盒,其特征在于PCR检测试剂盒组成:10μL SYBRPremix Ex TaqTM,10μmol/L上游引物0.5μL、10μmol/L下游引物0.5μL,无核酸酶的双蒸水8μL,cDNA模板1μL。
6.如权利要求3所述的PCR检测试剂盒,其特征在于PCR检测的条件为:94℃预变性2分钟;40个循环:94℃变性15秒,60℃退火20秒,72℃延伸20秒。
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