[发明专利]SNHG9基因在细胞机械应力检测中的应用及试剂盒

说明书

本发明公开了一种SNHG9基因在细胞机械应力检测中的应用以及检测SNHG9基因的试剂盒，该试剂盒内包括了三对检测SNHG9基因表达水平的扩增引物，一对B2M内参引物，该试剂盒可用于细胞机械应力水平的辅助判断，高效，准确，便于操作的特征，具有潜在的应用价值。

(一)技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体地涉及一种SNHG9基因的PCR检测试剂盒及其在细胞机械应力检测中的应用。

(二)背景技术

在哺乳动物有机体中，细胞与邻近细胞之间的互作，细胞与细胞外基质(ECM)之间的互作，以及细胞与液体流之间的互作，产生了多种不同类型的机械信号。在细胞生长发育和新陈代谢的过程中，机械信号与生物信号之间通过一定的机制相互转换和相互影响，最终改变相关基因的表达状态，决定和控制细胞命运和组织形态，从而在有机体中发挥重要的调控作用。正确的机械信号能诱导细胞向正确的方向分化生长，而错误的机械信号则更容易导致疾病的发生。目前来看，细胞机械力调控的机制虽然尚未完全解析清楚，但大多可以被分解为3步：(1)机械信号传递到特定的细胞结构。(2)将机械信号转换为生物信号。(3)细胞对这些生物信号的后续反应。

为了明确机械信号在细胞各种生理过程或疾病发生中的角色，过去的许多年里已发展出各项在亚细胞水平测定机械力的仪器，如：牵引力显微镜，单分子原子显微镜，基于荧光能量共振转移的张力传感器等。这些仪器都是为了精确定量机械应力而生，精准度很高，但价格昂贵，难以推广，不能惠及广大普通科研工作者，而且仪器大多不便于使用，得出可靠数据所费时间也较长。所以，亟需一种可以快速、准确检测细胞机械应力水平的方法。

SNHG9，全称小核仁RNA宿主基因(small nucleolar RNA host gene 9)，其基因表达水平受机械力水平调控。当细胞感知到的机械力水平升高时，SNHG9的基因表达水平也随之升高。

(三)发明内容

本发明目的是提供一种SNHG9基因在细胞机械应力检测中的应用以及检测SNHG9基因的试剂盒，该试剂盒内包括了三对检测SNHG9基因表达水平的扩增引物，一对B2M内参引物，该试剂盒可用于细胞机械应力水平的辅助判断，具有高效，准确，便于操作的特征，具有潜在的应用价值。

本发明采用的技术方案是：

本发明提供一种SNHG9基因在细胞机械应力检测中的应用，所述应用是采用PCR检测待测细胞中SNHG9基因表达量，若相比正常细胞(即正常条件下培养的细胞)的SNHG9基因表达量升高，则待测细胞机械应力水平升高。

本发明还提供一种用于SNHG9基因表达量检测的PCR检测试剂盒，所述试剂盒包括SNHG9基因检测引物、内参基因B2M引物；

所述SNHG9基因检测引物为SNHG9F#1+SNHG9R#1、SNHG9F#2+SNHG9R#2，SNHG9F#3+SNHG9R#3中的一组，其序列如下：

SNHG9 F#1：CTACGTCACCCGAAAAGCGA(SEQ ID NO.1)；

SNHG9 R#1：CGCGGACGTTTATAGCCACT(SEQ ID NO.2)；

SNHG9 F#2：TAGGACACTGGTCCTCCCAC(SEQ ID NO.3)；

SNHG9 R#2：CAGCCAAGTTCCCCCAACC(SEQ ID NO.4)；

SNHG9 F#3：GGGAATCTACGTCACCCGAA(SEQ ID NO.5)；

SNHG9 R#3：CACTCTTCGGGTGGATTCCC(SEQ ID NO.6)；