[发明专利]一种用于识别磷脂酰胆碱链长异构体的质谱分析方法

说明书

本发明涉及一种用于识别磷脂酰胆碱链长异构体的质谱分析方法，该方法包括以下步骤：构建磷脂酰胆碱链长异构体及特征离子高分辨质谱模拟数据库；建立液相色谱‑高分辨质谱联用仪磷脂酰胆碱识别方法，将待检测样品进行液相色谱‑高分辨质谱联用检测，根据磷脂酰胆碱正离子和负离子三级碎片离子精确质量数质谱特征，和模拟数据库比对进行质谱分析，获得磷脂酰胆碱链长异构体的识别结果。可以用于功能性磷脂酰胆碱识别，为开发新型功能性磷脂酰胆碱提供技术支撑。

技术领域

本发明属于化学分析检测领域，具体涉及一种用于识别磷脂酰胆碱链长异构体的质谱分析方法。

背景技术

磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine，PC)，由甘油、脂肪酸(二分子)、磷酸和胆碱失水缩合而成的脂(图1)，分子中的脂肪酸链有饱和与不饱和两种，是非极性的疏水尾；磷酸胆碱部分为偶极离子，是极性的亲水头，被誉为蛋白质、维生素之后的“第三营养素”。它是生命的物质基础，是细胞各种膜结构的基本原料，存在于每个细胞中。

磷脂酰胆碱是构成细胞膜的主要成分，能促进细胞吸收营养物质排除毒性废物。可辅助脂溶性维生素A、D、E和K的吸收并使这类维生素的利用率增加100％，补充足够的磷脂酰胆碱可增进细胞的活力，增强人体免疫力和抗病能力。磷脂酰胆碱是强有力的乳化剂，它能使血液中的胆固醇和中性脂肪分解成极小的微粒，以便于组织的吸收和代谢，从而预防了胆固醇在血管内的沉积，防止胆固醇沉积所造成的动脉硬化、高血压及心脏病。磷脂酰胆碱是较典型的兼容分子，参与各种脂蛋白的组成，是各种脂类依赖性酶起催化作用时不可缺少的物质。它与激素的作用机理有关，在神经兴奋的传递中具有重要作用。

富含磷脂酰胆碱的物质包括：蛋黄、牛奶、动物的脑、骨髓、心脏、肺脏、肝脏、肾脏以及大豆和酵母等。磷脂酰胆碱在体内多与蛋白质结合，以脂肪蛋白质(脂蛋白)的形态存在着。由于磷脂酰胆碱优良的生理功能，美国食品药品监督管理局(FDA)规定：在婴幼儿奶粉里，必须添加卵磷脂(磷脂酰胆碱)。

大量研究表明，结构中含有功能性脂肪酸的磷脂酰胆碱同分异构体分子具有更优良的性能，不仅同时具有磷脂和功能性脂肪酸的生理功能，而且结构更稳定、不易于发生氧化反应，更有利于人体的吸收与利用。功能性磷脂酰胆碱具有促进大脑神经系统发育、提高记忆力、降血脂、降低胆固醇、抗衰老、预防癌症等众多生理功能[1-2]。但是，这类功能性磷脂酰胆碱同分异构体分子，一直以来难以被识别。

高分辨质谱仪具有高分辨率、高灵敏度以及高质量精度的特点，可以在一次扫描中生成大量质谱信息，可以获得未知数的多级质谱碎片，在能够获得大量的脂质信息，从而实现复杂磷脂酰胆碱的检测和鉴定。特别是随着基于分离的“液相色谱-质谱方法”的发展，脂质的精确结构解析以及精确结构所引起的生物学作用逐渐成为研究的热点。尽管依赖串联质谱的磷脂酰胆碱的双键位置异构体能够被识别出来，但功能性磷脂酰胆碱同分异构体分子依然需要挖掘其质谱特征碎裂方式可有望被识别。

参考文献：[1]张芹，孙兆敏，徐杰，等.酶法合成富含二十二碳六烯酸的磷脂酰丝氨酸[J].中国食品学报，2016，16(3)：81－87.

[2]王湘，魏芳，董绪燕，等.酶法合成富含花生四烯酸结构磷脂[J].中国油料作物学报，2015，37(6)：889－896.

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于识别磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine，PC)链长异构体的质谱分析方法。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：

一种用于识别磷脂酰胆碱链长异构体的质谱分析方法，其包括以下步骤：

构建磷脂酰胆碱链长异构体及特征离子高分辨质谱模拟数据库；