[发明专利]一种三七酒中39种有效成分的UPC2-PDA-Q-Tof/MS检测方法

说明书

本发明公开了一种三七酒中39种有效成分的UPC2‑PDA‑Q‑Tof/MS检测方法，首先将三七酒待测酒样冷冻干燥成固体，以甲酸‑水‑甲醇混合溶液溶解后过0.22μm滤膜，经UPC2 BEH柱进行梯度洗脱分离，同时采集UPC2‑PDA模式及MS模式数据，ESI正负离子模式分别下监测，将获得的待测样品谱图与标准谱图对比，保留时间相同的即为对应物质，通过MS模式标准曲线线性回归方程对各有效成分进行定量。本发明前处理简单，线性相关系数大于0.99，回收率85％‑115％之间，相对标准偏差在10％以内。

技术领域

本发明属于功能酒领域，具体涉及一种三七酒中39种有效成分的UPC2-PDA-Q-Tof/MS检测方法。

背景技术

我国酿酒历史悠久，品种繁多，以白酒、果酒和米酒居多，但是这类酒一般度数偏高，过量饮用会对身体产生危害。随着人们对自身健康的关注，各种低度数的药酒应运而生，三七酒就是其中之一。三七为五加科人参属植物，在我国已有600多年的药用历史，其作为一种名贵中药，具有化瘀止血、消肿止痛等功效。目前以三七为配方进入《国家基本药物目录》和《国家中药保护品种目录》的制剂达20余种。三七复杂的化学成分是其良好功效的基础。经过国内外研究者们近80年的努力，已从三七中分离、提取、鉴定了百余种化合物，基本阐明了三七中主要化合物的结构组成。人们将三七和酒结合在一起制作三七酒，三七酒制作简单，同时兼具三七的营养成分，长期少量饮用有一定的养生保健作用。

然而，在目前三七酒的制作过程中，出现了各种各样、五花八门的工艺，有直接浸泡的，有煮酒的，有粉碎浸泡的，有高度、低度浸泡的的，有减压萃取的，还有加菌发酵的，但是各种提取方式对有效成分的提取率差异很大，而且三七有效成分种类多，各种物质的溶出情况不尽相同，这也阻碍了三七酒的发展。

目前现有资料显示三七有效成分的检测方法主要是高效液相色谱法(HPLC)，质谱法，薄层色谱法等，检测通量少，不能整体反应出三七有效成分的含量，且效率低，费时。

超临界流体色谱法(Supercritical Fluid Chromatography，SFC)技术是以超临界状态的CO₂为流动相，在超临界状态下的CO₂，黏度系数较低、传质性能好、分离效率高且绿色环保，这些优势都突破了传统液相色谱局限性。优以超高效合相色谱(UltraPerformanceConvergence Chromatography，UPC2)为代表的新型色谱分离技术弥补了这传统色谱的限制，在流动相上将GC和LC技术结合，分离分析能力兼具GC、LC的两项优势。高分辨飞行时间质谱(Time of Flight Mass Spectrometer，TOF)具有分辨率高、速度快、质量上限高、分析通量高等优点，可实现高达几百种物质的采集分析。

发明内容

本发明针对现有技术所存在的问题，提供了一种三七酒中39种有效成分的UPC2-PDA-Q-Tof/MS检测方法。本发明能够准确、快速、稳定、高效的对三七酒中有效成分进行定性定量分析，为三七酒的质量把控提供重要参考意义。

本发明三七酒中39种有效成分的UPC2-PDA-Q-Tof/MS检测方法，首先将三七酒待测酒样经冷冻干燥成固体，以甲酸-水-甲醇混合溶液溶解后过0.22μm滤膜，再经UPC2BEH柱进行梯度洗脱分离，同时采集UPC2-PDA模式及MS模式数据，ESI正负离子模式分别下监测，将获得的待测样品谱图与标准谱图对比，保留时间相同的即为对应物质，通过MS模式标准曲线线性回归方程对各有效成分进行定量。

本发明三七酒中39种有效成分的UPC2-PDA-Q-Tof/MS检测方法，具体包括如下步骤：

步骤1：前处理

将三七酒待测酒样冷冻干燥成固体，以0.4％甲酸-5％水-94.6％甲醇混合溶液溶解后过0.22μm滤膜；

步骤2：标准品的配制