[发明专利]转氨酶突变体及其应用

权利要求书

1.一种转氨酶突变体，其特征在于，所述转氨酶突变体的氨基酸序列是SEQ ID NO：1所示序列发生突变的氨基酸序列，所述突变的氨基酸位点选自如下任意一种：R416A、R416C、R416H、R416Q、R416T、R416S、R416T+F89Y、R416A+A417S、R416A+C418A、R416A+C418S及R416T+A417S+F89Y。

2.一种DNA分子，其特征在于，所述DNA分子编码权利要求1所述的转氨酶突变体。

3.一种重组质粒，其特征在于，所述重组质粒连接有权利要求2所述的DNA分子。

4.根据权利要求3所述的重组质粒，其特征在于，所述重组质粒为pET-21b(+)、pET-22b(+)、pET-3a(+)、pET-3d(+)、pET-11a(+)、pET-12a(+)、pET-14b、pET-15b(+)、pET-16b(+)、pET-17b(+)、pET-19b(+)、pET-20b(+)、pET-21a(+)、pET-23a(+)、pET-23b(+)、pET-24a(+)、pET-25b(+)、pET-26b(+)、pET-27b(+)、pET-28a(+)、pET-29a(+)、pET-30a(+)、pET-31b(+)、pET-32a(+)、pET-35b(+)、pET-38b(+)、pET-39b(+)、pET-40b(+)、pET-41a(+)、pET-41b(+)、pET-42a(+)、pET-44a(+)、pET-49b(+)、pQE2、pQE9、pQE30、pQE31、pQE32、pQE40、pQE70、pQE80、pRSET-A、pRSET-B、pRSET-C、pGEX-5X-1、pGEX-6p-1、pBV220、pBV221、pBV222、pTrc99A、pTwin1、pEZZ18、pKK232-8、pUC-18或pUC-19。

5.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞含有权利要求4或3所述的重组质粒。

6.根据权利要求5所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞为原核细胞或真核细胞。

7.根据权利要求6所述的宿主细胞，其特征在于，所述真核细胞为酵母细胞。

8.根据权利要求5所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞为感受态细胞。

9.根据权利要求8所述的宿主细胞，其特征在于，所述感受态细胞为大肠杆菌BL21细胞或大肠杆菌W3110。

10.一种生产手性胺的方法，包括采用转氨酶对酮类化合物及氨基供体进行催化转氨基反应的步骤，其特征在于，所述转氨酶为权利要求1所述的转氨酶突变体。

11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，所述酮类化合物为其中，R₁和R₂各自独立地为C1～C8烷基、C5～C10环烷基、C6～C10芳基或C5～C10杂芳基，或者R₁和R₂与羰基上的碳共同形成C5～C10杂环基、C5～C10碳环基或C5～C10杂芳基，所述C5～C10杂环基和C5～C10杂芳基中的杂原子各自独立地选自氮、氧和硫中的至少一种，所述C6～C10芳基中的芳基、C5～C10杂芳基中的杂芳基、C5～C10碳环基中的碳环基或C5～C10杂环基中的杂环基各自独立地未被取代或被卤素、烷氧基或烷基中的至少一个基团所取代。

12.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，所述酮类化合物为转氨基反应产物为

13.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，所述氨基供体为异丙胺或异丙胺盐。