[发明专利]一种检测生鲜乳中7种巴比妥类药物残留量的试剂盒

说明书

本发明涉及一种检测生鲜乳中7种巴比妥类药物残留量的试剂盒，所述试剂盒包括：乙腈、复合沉淀剂、复合吸附剂。本发明实现了同时测定生鲜乳中7种巴比妥类药物残留量，方法操作简单、快速、准确度和灵敏度高，可以做到批量测定，具有良好的实际应用前景。

技术领域

本发明属于药物检测试剂盒领域，特别涉及一种检测生鲜乳中7种巴比妥类药物残留量的试剂盒。

背景技术

巴比妥药物(barbiturates)属于安眠镇静药物，兽药临床用作镇静剂和化学保定剂，可引起近似生理性睡眠，主要表现在对中枢神经系统的抑制，还能抑制延脑的呼吸中枢及血管运动中枢。除此之外，巴比妥类药物也会在动物生产中用作促生长的饲料添加物，Hanzlik等1950年研究报道了苯巴比妥在动物日粮中的添加效应，育肥猪的增重效果可提高20％，饲料报酬可提高12％，取得明显经济效益。由于巴比妥类药物残留存在致畸、致癌等毒性作用，长时间的食用带有其残留的动物制品，容易造成药物积累，严重危害了人类的健康。张海棠等介绍了苯巴比妥在我国畜牧业生产过程中的非法使用，指出苯巴比妥注射后2～18h在动物体内达到峰值，半衰期缺位40-70h。因此，许多国家严禁将巴比妥药物用于人类，也禁止其作为饲料添加剂，同时，兽药临床也严格规定了巴比妥药物的休药期，防止动物体内该类药物蓄积浓度过高而影响食用者安全。

巴比妥类药物为巴比妥酸(丙二酰脲)的衍生物，为巴比妥酸在C5位上(R1和R2这2个取代位点)进行取代而得的一组中枢抑制药。其结构通式见图1，多为烷基取代基，取代基不同，药物的药理性质有所不同。它的种类很多，我国常见的有巴比妥、苯巴比妥、异戊巴比妥、戊巴比妥、司可巴比妥及其的钠盐等。取代基长而有分支(如异戊巴比妥)或双键(如司可巴比妥)，则作用强而时间短；以苯环取代(如苯巴比妥)则有较强的抗惊厥作用；C2位的O被S取代(如硫喷妥)，则脂溶性增高，静脉注射立即生效，但维持时间很短。根据作用时间分为长时(6～8h)如苯巴比妥；中时(3～6h)如戊巴比妥；短时(1～3h)如司可巴比妥；超短时(10～20min)如硫喷妥。巴比妥类药物抑制中枢神经的深度，一般与剂量成比例。小剂量起镇静作用，中等剂量有催眠作用，大剂量起麻醉作用。服用过量可引起昏迷，严重的可能致死；长期连用则可成瘾。

目前，国内外关于巴比妥类镇静药物残留的检测多针对血液样品、中成药、保健品以及饲料中，对于生鲜乳中残留检测的相关报道很少，且受到提取、净化技术操作相对繁琐，试剂毒性大，回收率不高等因素的制约。

CN102323414A公开的一种苯巴比妥均相酶免疫检测试剂盒及其制备方法，该方法主要采用酶联免疫法，且主要针对的是医学检测中苯巴比妥的测定。相较于本方法，其涉及检测的巴比妥类化合物覆盖面不够全面，且容易有假阳性的存在。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种检测生鲜乳中7种巴比妥类药物残留量的试剂盒，而本发明方法采用液相色谱-串联质谱法检测7种巴比妥类化合物，通过化合物特有的离子对进行定性确证，具有非常高的特异性，极大程度地降低了假阳性的发生概率。本发明方法根本性地解决了传统HPLC法前处理过程操作复杂、周期长、回收率低的缺陷，同时填补了生鲜乳领域巴比妥类检测方法的空缺，具有良好的应用前景。

本发明的一种检测生鲜乳中巴比妥类药物残留量的试剂盒，所述试剂盒包括：乙腈、复合沉淀剂、复合吸附剂；

其中所述复合沉淀剂为无水硫酸镁、氯化钠、柠檬酸钠和柠檬酸氢二钠的混合物；复合吸附剂为无水硫酸镁和PSA混合物。

所述复合沉淀剂中无水硫酸镁、氯化钠、柠檬酸钠和柠檬酸氢二钠的质量比为8:2:2:1；所述复合吸附剂中无水硫酸镁和PSA的质量比为6:1。

所述试剂盒用于同时检测巴比妥、苯巴比妥、戊巴比妥、异戊巴比妥、仲丁比妥、司可比妥和硫喷妥的残留量。

本发明的一种检测生鲜乳中巴比妥类药物残留量的方法，用于同时检测巴比妥、苯巴比妥、戊巴比妥、异戊巴比妥、仲丁比妥、司可比妥和硫喷妥的残留量，包括如下步骤：