[发明专利]一种超声波快速合成司美格鲁肽的方法

权利要求书

1.一种超声波快速合成司美格鲁肽的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)在超声波水浴的条件下，在固相合成树脂上偶联Fmoc保护α-氨基的Gly，制备得到Fmoc-Gly-固相合成树脂；

(2)在超声波水浴的条件下，脱除Fmoc保护基，然后按照偶联Fmoc或Boc保护α氨基的氨基酸或肽段，然后脱除Fmoc保护基的方法依次进行偶联：Fmoc或Boc保护α氨基的氨基酸的偶联顺序为：Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Val-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Trp(Boc)-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Lys(Alloc)-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Tyr(tBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Val-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Aib-OH、Boc-His(Trt)-OH；

(3)在超声波水浴的条件下，脱除Lys(Alloc)中的Alloc保护基团；

(4)在超声波水浴的条件下，偶联Fmoc-AEEA-OH，然后以脱除Fmoc保护基然后偶联的方法依次偶联Fmoc-AEEA-OH、Fmoc-Glu-OtBu和十八烷二酸单叔丁酯；

(5)裂解树脂和侧链保护基得到粗肽；

(6)纯化后得到司美格鲁肽精肽；

上述步骤(1)-(4)中，超声波水浴的条件为超声频率为25kHz-50kHz，水浴温度为20-35℃；

步骤(2)中，每次Fmoc或Boc保护α氨基的氨基酸或肽段偶联时间为5-20分钟；每次脱除Fmoc保护时间为1-5分钟；

步骤(3)中，脱除Lys(Alloc)中Alloc保护基团的方法为用DCM清洗3次；称取二甲胺硼烷，量取DCM，加入反应柱中，超声波条件下反应2分钟之后，加入Pd⁰(Ph₃P)，反应20分钟；然后用DCM清洗3次树脂，DMF清洗树脂3次，再用DCM清洗树脂3次，得到选择性脱除Alloc的肽树脂；

脱除Lys(Alloc)中Alloc保护基团的方法为以Pd⁰(Ph₃P)₄和Me₂NH·BH₃的组合，Pd⁰(Ph₃P)₄的用量为Alloc保护基团摩尔量的0.1-0.5倍，Me₂NH·BH₃的用量为Alloc保护基团摩尔量的20-60倍，脱除Alloc保护基团的反应时间为10-30分钟。

2.根据权利要求1所述的超声波快速合成司美格鲁肽的方法，其特征在于，所述固相合成树脂为Wang树脂。

3.根据权利要求1所述的超声波快速合成司美格鲁肽的方法，其特征在于，所述固相合成树脂的替代度范围为0.6～0.8mmol/g。

4.根据权利要求1所述的超声波快速合成司美格鲁肽的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述偶联采用的缩合剂为HOBt、DIC和DMAP的组合，HOBt、DCC和DMAP的组合，HOAt、DIC和DMAP的组合，HBTU、HOBt和DIPEA的组合，TBTU、HOBt和DIPEA的组合，或PyBOP、HOBt和DIPEA的组合的方法缩合。

5.根据权利要求4所述的超声波快速合成司美格鲁肽的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述偶联采用的缩合剂为HOBt、DIC和DMAP的组合方法缩合。