[发明专利]一种生产法尼烯的酿酒酵母工程菌及其应用在审
申请号: | 202011028630.1 | 申请日: | 2020-09-24 |
公开(公告)号: | CN112080440A | 公开(公告)日: | 2020-12-15 |
发明(设计)人: | 石贵阳;王均华;李由然;朱惠霖;张梁;丁重阳;徐沙;顾正华 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N1/19 | 分类号: | C12N1/19;C12N15/60;C12N15/53;C12N15/81;C12P5/02;C12R1/865 |
代理公司: | 无锡华源专利商标事务所(普通合伙) 32228 | 代理人: | 聂启新 |
地址: | 214122 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 生产 法尼烯 酿酒 酵母 工程 及其 应用 | ||
1.一种生产法尼烯的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)工程菌,其特征在于,所述酿酒酵母工程菌染色体整合表达强化甲羟戊酸途径基因,同时整合表达法尼烯合成酶编码基因Fsso;所述的甲羟戊酸途径基因为HMG1、ERG20、IDI1、ERG10、ERG12、ERG13、ERG8和MVD1中的一种或多种;所述甲羟戊酸途径基因为单拷贝或双拷贝,所述整合表达使用GAL启动子。
2.根据权利要求1所述的酿酒酵母工程菌,其特征在于,所述酿酒酵母工程菌以酿酒酵母YPH499为宿主。
3.根据权利要求1所述的酿酒酵母工程菌,其特征在于,所述酿酒酵母工程菌以pMD-19T simple为整合表达载体。
4.根据权利要求1所述的酿酒酵母工程菌,其特征在于,所述Fsso的核苷酸序列如SEQID NO.2所示。
5.权利要求1-4任一所述的酿酒酵母工程菌在生产法尼烯中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,将权利要求1-4任一所述的酿酒酵母工程菌先在YPD固体平板划线,30℃培养箱培养2-3d活化;接种活化后得到的单菌落到YPD培养基中培养18-24h进行种子培养;取种子培养液接种到YPD培养基中进行发酵,生产法尼烯。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述种子液的接种体积比为1-5%;所述发酵的条件为28-32℃,200-220rpm,发酵50-100h。
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