[发明专利]一种猪繁殖与呼吸综合征病毒阳性血清及其制备方法

权利要求书

1.一种猪繁殖与呼吸综合征病毒阳性血清，其特征在于该阳性血清是采用剖腹产、隔离饲养、人工饲喂的方式，排除了母源抗体的干扰的CDCD猪(经剖腹产且不吃母乳的猪)经高浓缩抗原多次免疫获得的，其血清的中和抗体效价≥1:32。

2.如权利要求1所述一种猪繁殖与呼吸综合征病毒阳性血清，其特征在于该血清的制备方法是：

(1)免疫原制备：将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)稀释成10^4.0TCID₅₀/mL，按MOI0.01～0.001接种Marc145细胞，37℃培养3～5日，当CPE达80％或以上时收获病毒液，经冻融三次后，离心去除细胞碎片，将上清液浓缩100倍，经反复清洗并恢复至原体积的1/100，在经无菌检验、支原体检验、鉴别检验和外源病毒检验合格，且病毒含量不低于10^9.0TCID₅₀/mL作为免疫抗原；

(2)动物的选择：选择3～4月龄(体重40～60kg)CDCD猪，猪瘟病毒、猪细小病毒、猪伪狂犬病毒、猪圆环2型病毒、牛病毒性腹泻病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒、口蹄疫病毒、猪乙脑病毒抗原和抗体均为阴性的健康猪；

(3)免疫及抗体水平监测以每头猪1mL免疫抗原肌肉接种作为基础免疫；2个月后，每头猪分别肌肉接种5mL，加强免疫后14天开始每隔7天采血检测血清中猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体中和抗体效价和病毒抗原。以血清中和抗体效价≥1:32且血清中蓝耳抗原为阴性为最佳采血时间；

(4)血清采集：采取颈动脉放血法采集免疫猪血清，在37℃静置1小时后，转入2～8℃过夜，经离心分离血清；

(5)血清的检验：对血清进行性状检验、无菌检验、支原体检验、外源病毒检验、中和效价测定、特异性检验，特异性检验包括猪伪狂犬病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪口蹄疫病毒、牛病毒性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪流行型腹泻病毒、猪轮状病毒、猪细小病毒、猪乙脑病毒等猪常见病原。

3.如权利要求1-2所述一种猪繁殖与呼吸综合征病毒阳性血清，其特征在于该血清主要用于兽用生物制品质量控制，也可用于猪繁殖与呼吸综合征病毒的其他相关检测。