[发明专利]一种检测沙门氏菌抗体的ELISA试剂盒及其检测方法和用途

说明书

本发明涉及一种检测沙门氏菌抗体的ELISA试剂盒及其检测方法和用途，属于微生物免疫学技术领域。包括抗原蛋白或抗原蛋白溶液或包被所述抗原蛋白溶液的包被板、酶标抗体、显色液、终止液、阳性血清和阴性血清。该试剂盒可快速、特异、灵敏的检测血清中的沙门氏菌抗体，检测血清抗体的灵敏度为1∶1000；该试剂盒操作简便、成本低廉、反应结果易于观察、灵敏度高、特异性强，适用于沙门氏菌的监测、流行病学调查及临床样本的检测等技术领域。

技术领域

本发明涉及一种检测沙门氏菌抗体的ELISA试剂盒及其检测方法和用途，属于微生物免疫学技术领域。

背景技术

沙门氏菌，为革兰氏阴性细菌，是一种无芽孢、荚膜的短杆菌，属于肠杆菌科细菌。沙门氏菌作为一种危害人和动物健康的主要的致病细菌，其菌属类型复杂且繁多。至今，人和动物中分离出了67个菌群、2000多个血清型及变种，肠炎沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌与鼠伤寒沙门氏菌是现有的较为普遍的沙门氏菌类型。沙门氏菌既能造成家畜、家禽的死亡，作为传染源又长期存于禽畜产品中，严重威胁人类的健康及食品安全。人类感染沙门氏菌的途径主要是通过食用不卫生的肉类、蛋类、未经消毒的奶制品、海产品及未经消毒的蔬菜等。我国每年因沙门氏菌感染而患病的人数约为3亿人，占病原菌引起食源性患病人数的70％～80％。目前，食源性致病菌检测方法很多，大致可以分为传统的检测方法、免疫学检测方法以及现代分子生物学检测方法等。平皿培养法等传统检测方法应用较广泛，检测结果相对稳定，但操作程序繁琐、耗时长，对操作人员的要求较高，传统的检测方法已经不足以保障食品安全问题；免疫学检测方法需要抗体、酶等，费用高，且存在特异性差等问题；PCR、LCR、LAMP等现代分子生物学检测方法已应用到沙门氏菌检测中，但这些检测方法需要酶、PCR仪类变温仪器等的参与。所以，基于沙门氏菌的现有的检测方法存在的许多不足的现状，已有试剂盒价格比较昂贵不利于大规模推广，因此建立一种快速、灵敏、便携、价格低廉的沙门氏菌等食源性致病菌的检测方法，对于维护我国食品安全尤为重要。

发明内容

针对现有技术的上述缺陷，本发明提出了一种检测沙门氏菌抗体的ELISA试剂盒及其检测方法和用途。

一种检测沙门氏菌抗体的ELISA试剂盒，包括抗原蛋白或抗原蛋白溶液或包被所述抗原蛋白溶液的包被板，所述抗原蛋白为如下a或b或c：

SEQ ID NO.2序列所示的蛋白质；

在SEQ ID NO.2序列所示的蛋白质的N端和/或C端连接标签得到的融合蛋白质；

将a)或b)所示蛋白质的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由SEQ ID NO.2序列衍生的蛋白质。

进一步地，根据上述所述的检测沙门氏菌抗体的ELISA试剂盒：

所述抗原蛋白溶液的包被浓度如下：100μL/孔、抗原蛋白溶液浓度为10μg/mL。

进一步地，根据上述所述的检测沙门氏菌抗体的ELISA试剂盒：

还包括酶标抗体、显色液、终止液、阳性血清和阴性血清。

进一步地，根据上述所述的检测沙门氏菌抗体的ELISA试剂盒：

所述酶标抗体为HRP兔抗鸡IgG(生产厂家为Bethyl)，稀释倍数为1∶10000。

进一步地，根据上述所述的检测沙门氏菌抗体的ELISA试剂盒：

所述阳性血清为通过沙门氏菌攻毒SPF鸡后的血清；阴性血清为SPF鸡血清。

进一步地，根据上述所述的检测沙门氏菌抗体的ELISA试剂盒：

所述显色液为TMB，所述终止液为2mol/L的H₂SO4。