[发明专利]一种提高新霉素产量的生产方法

权利要求书

1.一种提高新霉素产量的生产方法，包括斜面培养、种子培养和发酵培养，其特征在于，采用弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)在发酵培养基中进行发酵培养15～25h，然后每6-8h补加一次料液，每次补加料液的量为发酵液体积的1.5％～2.0％，补加的料液为玉米淀粉、米粉、玉米蛋白粉、硫酸铵和淀粉酶的混合溶液，发酵培养结束后得含有新霉素的发酵液。

2.如权利要求1所述的生产方法，其特征在于，所述补加的料液组分如下，均为质量百分比：玉米淀粉10.00～15.00％，米粉25.00～35.00％，玉米蛋白粉7.00～9.00％，硫酸铵0.20～0.40％，淀粉酶0.10～0.20％，溶剂水；优选的，所述淀粉酶的酶活为3000-4000U/g。

3.如权利要求1所述的生产方法，其特征在于，所述发酵培养基的组分如下，均为质量百分比：葡萄糖1.50～3.00％、米粉7.00～9.00％、花生饼粉1.50～3.00％、酵母粉1.00～2.00％、蛋白胨1.00～2.00％、硫酸铵0.20～3.00％、玉米浆0.03～0.50％、淀粉酶0.30～0.60％、玉米蛋白粉0.50～1.50％、氯化钠0.50～0.80％、碳酸钙0.50～1.00％、磷酸二氢钾0.05-0.10％、豆油0.20～0.50％、磷酸氢二钠0.01～0.10％，余量水，pH自然；优选的，所述淀粉酶的酶活为3000-4000U/g。

4.如权利要求1所述的生产方法，其特征在于，具体包括如下步骤：

(1)斜面培养：取弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)接种于斜面培养基中，在温度29～30℃、湿度30～60％的条件下培养96～168h，制得斜面孢子；

(2)种子培养：将步骤(1)制得的斜面孢子接种于种瓶培养基中，在温度29～30℃、湿度30～60％、220～240rpm的条件下培养24～40h，制得菌体浓度为1～9×10⁸cfu/mL的种子液；

(3)发酵培养：将步骤(2)制得的种子液按体积百分比5～8％接种于发酵培养基中，在温度33～35℃、罐压0.01～0.02Mpa、溶氧55～80mg/L的条件下发酵培养15～25h，然后每6-8h补加一次料液，每次补加料液的量为发酵液体积的1.5％～2.0％，补加的料液为玉米淀粉、米粉、玉米蛋白粉、硫酸铵和淀粉酶的混合溶液，发酵培养结束后得含有新霉素的发酵液。

5.如权利要求4所述的生产方法，其特征在于，步骤(1)中所述斜面培养基组分如下，均为质量百分比：琼脂2.0～2.2％、葡萄糖0.8～1.2％、蛋白胨0.4～0.6％、磷酸氢二钾0.04～0.06％、牛肉膏0.2～0.4％，余量水，pH自然。

6.如权利要求4所述的生产方法，其特征在于，步骤(1)中所述斜面培养的湿度为40～50％，培养时间为115h。

7.如权利要求4所述的生产方法，其特征在于，步骤(2)中所述种瓶培养基组分如下，均为质量百分比：可溶性淀粉1.00～2.00％、麦芽糖0.60～1.00％、酵母粉0.60～1.00％、磷酸二氢钾0.05～0.10％、硫酸镁0.05～0.10％、余量水，pH自然。

8.如权利要求4所述的生产方法，其特征在于，步骤(2)中所述种子培养的湿度为40～50％，转速为220rpm，培养的时间为25h。

9.如权利要求4所述的生产方法，其特征在于，步骤(3)中所述发酵培养的溶氧为70mg/L，发酵培养20h后开始加入补加料液，发酵培养的总时间184h。

10.如权利要求4所述的生产方法，其特征在于，步骤(3)中所述每次补加料液的量为发酵液体积的1.5％。