[发明专利]一种提高新霉素产量的生产方法

说明书

本发明涉及一种提高新霉素产量的生产方法。本发明的生产方法包括斜面培养、种子培养和发酵培养，采用弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)在发酵培养基中进行发酵培养15～25h，然后每6‑8h补加一次料液，补加的料液为玉米淀粉、米粉、玉米蛋白粉、硫酸铵和淀粉酶的混合溶液，发酵培养结束后制得含有新霉素的发酵液。本发明通过在发酵培养过程中的特定时间段补加料液，尤其是补加的料液中以淀粉和米粉经淀粉酶酶解后的产物作为持续碳源，以玉米蛋白粉作为迟效氮源和以硫酸铵作为速效氮源的组合方式，充分利用玉米蛋白粉富含含硫氨基酸和亮氨酸等多种氨基酸的优势，从而提高新霉素产量。

技术领域

本发明涉及一种提高新霉素产量的生产方法，属于微生物发酵技术领域。

背景技术

新霉素是由弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)发酵产生的一种氨基糖苷类抗生素，其主要成分有新霉素A、新霉素B、新霉素C三种。其中以新霉素B为主要有效成分，新霉素C为次要成分，新霉素A为杂质。

新霉素抗菌谱广，对革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌和结核杆菌均有良好的抑制作用，是重要的抗感染药物。作为一种常用兽药，新霉素用于抑制家畜、家禽的细菌性胃肠道感染己有30余年的历史，新霉素作为饲料抗生素添加剂使用，用于预防畜禽、尤其是幼龄鸡细菌感染引起的早期损失和肠炎，提高饲料利用率，促进畜禽生长。在兽医临床上，新霉素是治疗畜禽细菌性肠炎的首选药物之一，其功效特佳；另外，新霉素还被普遍用于治疗乳腺炎、角膜炎、结膜炎、耳炎、皮炎、外伤感染、足腐烂等疾病。

目前对微生物发酵法生新霉素的研究主要是菌种选育和发酵条件优化两个方面，同时提取方面也进行了大量的研究工作。如中国专利文献CN105400852A(申请号201510991909.2)公开了采用氨基酸发酵菌渣替代发酵原料生产新霉素的方法。中国专利文献CN107557413A(申请号201710959459.8)公开了在发酵培养的过程中采用流加或一次性顿补的方式加入酵母粉和/或半胱氨酸和/或S-腺苷-L-蛋氨酸和/或硫酸铵和/或硫酸亚铁和/或硫酸镁和/或硫酸锰的方法，放罐后发酵液中各有关物质的含量分别为新霉素B≥80％，新霉素C≤15％。目前可见报道的最高水平，为中国专利文献CN106086119A(申请号201610719923.1)公开的发酵单位31060U/mL，发酵周期控制在230h以内。但是上述现有技术都存在新霉素产量有待进一步提高或发酵周期较长的问题。

发明内容

针对现有技术的不足，尤其针对现有技术的发酵周期长，中间补料控制不严谨的现状，本发明提供了一种提高新霉素产量的生产方法。

本发明的技术方案如下：

一种提高新霉素产量的生产方法，包括斜面培养、种子培养和发酵培养，采用弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)在发酵培养基中进行发酵培养15～25h，然后每6-8h补加一次料液，每次补加料液的量为发酵液体积的1.5％～2.0％，补加的料液为玉米淀粉、米粉、玉米蛋白粉、硫酸铵和淀粉酶的混合溶液，发酵培养结束后得含有新霉素的发酵液。

根据本发明优选的，所述补加的料液组分如下，均为质量百分比：玉米淀粉10.00～15.00％，米粉25.00～35.00％，玉米蛋白粉7.00～9.00％，硫酸铵0.20～0.40％，淀粉酶0.10～0.20％，溶剂水；优选的，所述淀粉酶的酶活为3000-4000U/g。

进一步优选的，所述补加的料液组分如下，均为质量百分比：包括玉米淀粉15.00％，米粉30.00％，玉米蛋白粉8.00％，硫酸铵0.20％，淀粉酶0.10％，溶剂水。