[发明专利]丙烷氧化菌测试瓶及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种丙烷氧化菌测试瓶及其制备方法。本发明提供的丙烷氧化菌测试瓶包括装有培养基的密封试管，其中所述培养基包括硫酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、硫酸镁、乙二胺四乙酸、正丙醇以及任选的微量元素溶液和刃天青溶液。本发明提供的丙烷氧化菌测试瓶能够满足油气微生物勘探工程上大批样品的检测需求，大大缩短了检测周期，提高了检测效率。

技术领域

本发明涉及油气微生物检测领域，具体涉及一种丙烷氧化菌测试瓶及其制备方法和应用。

背景技术

传统的油气微生物勘探技术是通过对地表土壤样品中油气微生物富集培养、分离以及微生物代谢产物的生理、生化分析来研究土壤中油气微生物的异常，根据油气指示菌的数量异常来预测下覆油气藏的分布。油气微生物勘探的关键是烃氧化菌的专属性，甲烷氧化菌是微生物勘探中利用最广泛的一种指标，但是由于甲烷气体容易在地表形成，因此在其在利用过程中需要排除地表生物成因甲烷的干扰。其他短链烃(C2-C5)氧化菌被认为是比较可靠的指标，其中丙烷氧化菌已在国内外已经被证明是一种有效的油气微生物勘探指标。

目前油气微生物培养法仍然是油气微生物检测的主流方法，其中MPN充气法和平板菌落计数法是最常用的方法。MPN充气法是微生物活菌数测定的经典方法，根据土壤稀释菌液接种培养后所生长的微生物的试管数，用统计数学方法计算出原始的含菌量。该方法的优势在于能够比较准确的确定土壤样品中微生物的数量，而且操作方法比较简单。平板菌落计数法将土壤稀释液涂布在琼脂培养基上，经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，通过统计平板上生长的菌落数来获取土壤样品中微生物数量信息的检测方法。这两种方法都有明显的不足，MPN充气法充入烃类气体后试管内产生正压，容易在培养过程中发生漏气，另外在培养之前和培养中可能染菌，给培养结果带来一定的误差；此外，烃类气体易燃易爆，在操作过程中存在安全隐患；平板菌落计数法测试结果误差较大，方法繁杂。而且这两种方法不适于工程上大量样品的勘探检测。因此，迫切需要研制出一种简单、准确、针对性强的气态烃氧化菌测试新工具和新方法，以此满足工程上油气微生物勘探的实际产生需求。

发明内容

丙烷氧化菌是油气微生物勘探中应用最广、灵敏度最高的油气指示菌指标之一，本项发明根据油气微生物检测实际工程需求，发明了一种丙烷氧化菌测试瓶的制作方法，所制作的丙烷氧化菌测试瓶能够快速准确的测定土壤样品中丙烷氧化菌的数量，克服了传统方法存在的弊端，使得油气微生物勘探中丙烷氧化菌的检测更方便、更准确。

本发明的第一方面提供了一种丙烷氧化菌测试瓶，其包括装有培养基的密封试管，其中所述培养基包括硫酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、硫酸镁、乙二胺四乙酸、正丙醇以及任选的微量元素溶液和刃天青溶液。

根据本发明的一些实施方式，所述培养基的配方包括：(NH₄)₂SO₄ 0.2-0.4g/L、KNO₃1.0-1.4g/L、NaH₂PO₄ 1.3-1.7g/L、K₂HPO₄·3H₂O 1.6-2.0g/L、MgSO₄·7H₂O 0.4-0.6g/L、EDTA0.1-0.3g/L和3-7ml/L正丙醇。

根据本发明的优选实施方式，所述培养基的配方包括：(NH₄)₂SO₄ 0.2-0.4g/L、KNO₃1.1-1.3g/L、NaH₂PO₄ 1.4-1.6g/L、K₂HPO₄·3H₂O 1.7-1.9g/L、MgSO₄·7H₂O 0.4-0.6g/L、EDTA0.1-0.3g/L和4-6ml/L正丙醇。