[发明专利]一种可溶性表达系统及其在蛋白可溶性表达中的应用

权利要求书

1.一种原核生物可溶性表达系统，其特征在于，所述可溶性表达系统具有巯基氧化酶基因和蛋白质二硫键异构酶基因；所述蛋白质二硫键异构酶基因前具有突变型trx标签。

2.根据权利要求1所述的可溶性表达系统，其特征在于，巯基氧化酶基因为ERV1，序列如SEQ ID NO.1所示；蛋白质二硫键异构酶基因选自序列如SEQ ID NO.2所示的hPDI、序列如SEQ ID NO.3所示的sPDI或序列如SEQ ID NO.4所示的DsbC。

3.根据权利要求1所述的可溶性表达系统，其特征在于，巯基氧化酶基因前也具有突变型trx标签。

4.根据权利要求1所述的可溶性表达系统，其特征在于，突变型trx标签序列如SEQ IDNO.8所示。

5.根据权利要求1所述的可溶性表达系统，其特征在于，还包括启动子序列；优选的，启动子为阿拉伯糖启动子或T7启动子。

6.包含权利要求1～5任一项所述的表达系统的载体。

7.包含权利要求1～5任一项所述的表达系统或权利要求6所述的载体的试剂盒。

8.一种原核生物可溶性表达目标蛋白的方法，其特征在于，用带有权利要求1～5任一项所述的表达系统的载体转化原核宿主细胞，所述原核宿主细胞中还同时具有目标蛋白表达载体。

9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述目标蛋白要求形成至少两个链内或链间二硫键以获得生物学活性；优选的，所述目标蛋白为羧肽酶B或胰蛋白酶原。

10.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述原核宿主细胞为大肠杆菌，优选为E.coli BL21(DE3)。