[发明专利]生物样品中菌体的分离、质谱鉴定及药物敏感性检测方法

说明书

本发明公开了一种生物样品中菌体的分离方法，采用微流控系统；并包括以下步骤：a、通过加样装置将生物样品加入微流控芯片中的加样室，将微流控芯片静置第一预设时间后，控制转动装置按照第一转速带动微流控芯片进行离心旋转，生物样品中含有细菌和真菌中的至少一种；b、将微流控芯片离心旋转后控制转动装置停止，通过加样装置将重悬液加入加样室，并控制转动装置按照第二转速带动微流控芯片进行正反交替离心旋转，将微流控芯片进行正反交替离心旋转后，控制转动装置按照第一转速带动微流控芯片进行离心旋转，第二转速小于第一转速。本发明公开了一种生物样品中菌体的质谱鉴定方法。本发明公开了一种生物样品中菌体的药物敏感性检测方法。

技术领域

本发明涉及菌体检测技术领域，特别是涉及一种生物样品中菌体的分离方法、质谱鉴定方法及药物敏感性检测方法。

背景技术

快速的细菌或者真菌鉴定和药敏试验是确定抗生素或抗真菌药物能否有效地治疗细菌或者真菌感染性疾病，是临床上治疗细菌或者真菌感染、指导医生用药的关键。目前临床上对于基于细菌感染血培养或脑脊液感染来说，通常需要放入增菌瓶进行增菌。在获得报阳的样品瓶之后，还需要继续进行划线培养，时间消耗过长。

目前临床上快速分离细菌的方法包括差速离心法、过滤法、电位捕获法等。其中，临床上标准的流程是平板划线菌落培养，该方法往往需要过夜(12-24小时)的培养，缺点是耗费时间。由于细菌增菌瓶中有需要细菌的代谢产物，同时包含血液样品中的白细胞等细胞杂质，往往需要进行简单过滤之后，加入细胞裂解液，然后进行离心、重悬、再次离心、提取等步骤。但是该方法通常需要人工参与(如加入细胞裂解液、重悬液等步骤)，操作步骤多，存在费时费力的缺陷。

发明内容

基于此，有必要针对现有快速分离细菌的方法通常需要人工参与，操作步骤多，存在费时费力的问题，提供一种生物样品中菌体的分离方法、质谱鉴定方法及药物敏感性检测方法。

一种生物样品中菌体的分离方法，采用微流控系统，所述微流控系统包括：

微流控芯片，所述微流控芯片设置有多个工作区，每个所述工作区开设有：加样室、反应室、样品收集室、虹吸阀以及废液室；所述加样室、所述反应室、所述样品收集室和所述废液室沿径向依次间隔设置，所述反应室分别与所述加样室和所述样品收集室连通，所述反应室通过所述虹吸阀与所述废液室连通；

加样装置，用于将液态样品加入所述加样室内，所述液态样品包括生物样品或重悬液；

旋转伸缩装置，与所述加样装置固定连接；

控制装置，分别与所述加样装置和所述旋转伸缩装置电连接，用于通过所述旋转伸缩装置控制所述加样装置沿所述旋转伸缩装置的轴向做旋转和伸缩运动，以使所述加样装置将所述液态样品加入所述微流控芯片内，还用于控制所述加样装置加入所述微流控芯片内的加样量；

所述分离方法包括以下步骤：

a、通过所述加样装置将生物样品加入所述微流控芯片中的加样室，将所述微流控芯片静置第一预设时间后，控制转动装置按照第一转速带动所述微流控芯片进行离心旋转，所述生物样品中含有细菌和真菌中的至少一种；

b、将所述微流控芯片离心旋转后控制所述转动装置停止，通过所述加样装置将重悬液加入所述加样室，并控制所述转动装置按照第二转速带动所述微流控芯片进行正反交替离心旋转，将所述微流控芯片进行正反交替离心旋转后，控制所述转动装置按照所述第一转速带动所述微流控芯片进行离心旋转，所述第二转速小于所述第一转速。

在其中一个实施例中，所述生物样品选自唾液、血液、血清、血浆、组织裂解液、羊水、绒毛、阴道分泌物、粪便、脑脊液或尿液。

在其中一个实施例中，所述第一转速的设定使得所述微流控芯片中的液态样品流入所述废液室，所述第二转速的设定使得所述反应室和所述样品收集室中的样品混合，所述混合包括沉淀和液体的混合。