[发明专利]同位素稀释-OnlineSPE-HRMS同时检测地下水中五种农药的方法

权利要求书

1.一种同位素稀释-Online SPE-HRMS同时检测地下水中五种农药的方法，所述五种农药为五氯酚、2,4,6-三氯酚、2,4-滴、克百威、滴灭威，其特征在于，包括以下步骤：

1)地下水样品预处理方法

水样静置，取上清液，经0.45μm玻璃纤维滤膜过滤去除悬浮杂质，准确量取10mL水样过滤，随至加入10μL同位素内标混合溶液，摇匀，涡旋1min后，将所述水样转移至10mL进样瓶中，供上机分析；

所述同位素内标混合溶液为五氯酚-¹³C、2,4,6-三氯酚-¹³C、2,4-滴-d₃、克百威-d₃、涕灭威-d₃这五种同位素内标，浓度为100ng/mL；

2)富集、净化和洗脱分离方法：

包含两条流路分别进行自动化富集净化和洗脱分离，其中第一流路：从所述进样瓶抽取所述水样，用千分之一甲酸水溶液泵送所述水样至在线固相萃取柱进行富集，每次泵送2.5ml，泵送3次,累计泵送所述水样体积共7.5mL，完成富集；后用94％千分之一甲酸水和6％甲醇混合溶液冲洗在线固相萃取柱五分钟完成净化，净化完成后切换6通2位阀，第一流路以100％甲醇冲洗在线固相萃取柱，完成在线固相萃取柱再生，后流动相设为100％千分之一甲酸水平衡在线固相萃取柱；第二流路：在阀切换前是平衡色谱柱，阀切换后以一定梯度将富集在在线固相萃取柱上的目标物洗脱至色谱柱进行分离，具体洗脱梯度为5-6min，流动相保持10％甲醇和90％千分之一甲酸；6-11min，甲醇由10％升至70％；11-12min，甲醇比例由70％升至100％保持8min后甲醇降至10％保持6.6min等待下一针进样；

3)用预设的质谱条件进行分析

其中质谱条件为：离子源：电喷雾加热离子源；质量分析器：离子阱质量分析器(Orbitrap)；离子源温度：450℃；离子传输金属毛细管温度：320℃；喷雾电压：4.0kV；透镜电压：55kV；鞘气流速：55arb，辅助气流速：15arb；扫描模式：FullMS-ddMS²；采集范围：m/z100-1000；一级全扫描分辨率为70000FWHM；C-trap最大容量(ACGtarget)：3×10⁶；C-trap最大注入时间100ms；数据依赖二级子离子全扫描(dd-MS²)分辨率：17500FWHM；C-trap最大容量(ACGtarget)1×10⁵；C-trap最大注入时间50ms；归一化碰撞能量(NCEs)：50eV；动态排除：10s；柱温：40℃。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述在线固相萃取柱尺寸为50mm×0.5mm，60μm；所述色谱柱的尺寸为2.1×100mm，3.0μm。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述在线固相萃取柱为聚合物填料，色谱柱填料为极性加强的聚合物，色谱柱极性略强于在线固相萃取柱，通过这两种填料类型的极性匹配将保证目标物的峰型，提高分析的准确度。

4.根据权利要求1-3之一所述的方法，其特征在于，所述同位素内标混合溶液的配制：以甲醇为稀释液配制与目标物一一对应的五种同位素内标包括五氯酚-¹³C、2,4,6-三氯酚-¹³C、2,4-滴-d₃、克百威-d₃、涕灭威-d₃混合溶液，浓度为100ng/mL，配置完成后，放置-4℃保存。

5.根据权利要求1-4之一所述的方法，其特征在于，在步骤3)之前还包括：混合标准工作液的配制：分别移取10、20、50、100、150、200μL混合标准储备液和10.0μL同位素内标混合溶液至10.0mL超纯水五种农药配制成10、20、50、100、150、200ng/L的混合标准工作溶液，现配现用。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，混合标准储备液含有五氯酚、2,4,6-三氯酚、2,4-滴、克百威、涕灭威这五种物质，浓度为10.0ng/mL。