[发明专利]同位素稀释-OnlineSPE-HRMS同时检测地下水中五种农药的方法

说明书

本发明提供一种同位素稀释‑Online SPE‑HRMS分析地下水中五种农药的方法，水样经0.45μm玻璃纤维滤膜过滤去除悬浮杂质，取过滤水样10.0mL至大体积进样瓶。水样经在线固相萃取柱进行自动化富集净化。水样富集溶剂为千分之一甲酸水，净化溶剂为6％甲醇和百分之94％甲酸水。通过6通2位阀切换，五种待测目标物被洗脱至分析柱，洗脱溶剂为乙腈和千分之一甲酸水。同时采用同位素内标法进行定量。本发明将该方法应用到地下水水样分析，通过检测发现部分样品中检出克百威，检出浓度在2.33～12.33ng/L。

技术领域

本发明涉及一种地下水的水样检测方法，更具体的，涉及一种同位素稀释-在线固相萃取-液相色谱高分辨质谱(Online SPE-HRMS)同时检测地下水中五种农药的方法。

背景技术

我国是农业生产大国，随着粮食和其他农产品的需求日益增加，为了提高农作物产量，大量不同种类农药被用于防治病虫害。农药在施用过程中，容易进入地下水、地表水和土壤等不同区域并造成污染，其环境问题已引起人们的关注。五氯酚、2,4,6-三氯酚、2,4-滴、克百威、滴灭威五种农药属于高效、广谱的杀菌剂、杀虫剂和除草剂，且这几种农药在我国农业生产中的使用量较大、使用范围较广。五氯酚、2,4,6-三氯酚，广泛存在水环境中，是应用范围较广的氯酚类物质，可用作杀菌剂、杀虫剂、木材防腐剂等，由于其毒性较强、具有三致作用、污染面广、难以降解，被我国国家环保总局列为优先控制污染物。涕灭威、克百威是广谱的氨基甲酸酯类杀菌剂，具有易降解、残留期短、低毒等优点，被广泛用于粮食、蔬菜等农业生产中。2,4-滴是我国使用量较大的一类氯代苯氧羧酸类除草剂，由于其价格低廉、高效、低毒等，主要用来防治单子叶植物小麦、玉米、高梁等田间的除草生长。

目前在国内外文献中，检测水中这五种农药的方法主要有高效液相色谱法、气相色谱法、气相色谱-质谱联用法、液相色谱-质谱联用法等多种方法，其中GC、GC-MS需衍生化，其过程较为复杂、耗时。多采用液相色谱-质谱联用法。但在多残留分析中，低分辨质谱因分辨率低、扫描速度慢等，在高通量的检测具有一定的局限性。最近几年发展起来的一种新型的四极杆/静电场离子轨道阱高分辨率质谱仪(UPLC/Q Orbitrap)分辨率可高达280000，通过一级扫描可获得精确质量数且相对质量偏差在1～10×10^-6之间，具有良好的定性定量分析能力，在痕量化合物检测分析和筛查确证中具有明显优势。

地下水是人类重要的饮用及工农业用水资源，所以建立地下水中农药残留分析方法具有重要科学意义。目前，对地下水中农药残留分析方法已有相关研究，多采用液液萃取、加速溶剂萃取和固相萃取等方法，这些传统前处理方法较为复杂、耗时，且大都采用外标或一般内标法进行定量检测。对于用外标法定量，其准确性易受仪器条件、基质效应等因素的影响。一般内标定量，在一定程度上无法满足多组分的定量且也易受多种因素的影响。而同位素稀释法(Isotope Dilution,ID)是国际公认的化学计量方法，在试样处理前，向溶液中加入待测目标物的同位素，通过利用同位素比值变化来定量测定待测目标物浓度的方法。与传统定量方法相比，该方法能够准确地定量，在一定程度上弥补了外标法或一般内标法的不足，提高了定量结果的准确性和可靠性。

对于这五种农药，五氯酚和2,4,6-三氯酚地下水质量标准中推荐使用HJ 744-2015《水质酚类化合物的测定气相色谱质谱法》，2,4-滴、克百威和滴灭威推荐使用GB/T23214-2008《饮用水中农药及相关化学品残留量测定液相色谱串联质谱法》，针对这五种农药残留同时自动化分析方法还未见报道。

发明内容

针对现有技术中没有同时检测五种农药残留的缺陷，本研究采用同位素技术结合在线固相萃取，建立了一种同时检测地下水中五种农药的超高效液相色谱-串联质谱方法，具体方案如下：

本发明提供一种同位素稀释-Online SPE-HRMS同时检测地下水中五种农药的方法，所述五种农药为五氯酚、2,4,6-三氯酚、2,4-滴、克百威、滴灭威，包括以下步骤：