[发明专利]一种使用葛根药渣制备葛根多肽提取物的方法以及由此制得的葛根多肽提取物

权利要求书

1.一种使用葛根药渣制备葛根多肽提取物的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)乙醇溶液提取：将洗净干燥后的葛根药材粉碎过筛，加入药材10～15倍量的65％～80％乙醇水溶液回流提取3～5h，过滤，干燥；

(2)缓冲盐溶液提取：醇提后的葛根药渣用10～15倍量、含NaCl质量分数为0.05％～0.1％的浓度为0.1～0.5mol/L、pH为6.5～7.5的磷酸缓冲液，在20～40℃搅拌提取3～5h，提取结束后，离心，保留离心液；

(3)酸沉：离心液用盐酸溶液调节pH至3.5～5.0，放入3～5℃冰箱静置12～24h，离心，保留沉淀；

(4)第一次透析：将酸沉沉淀用适量的水溶解，并适当调节pH使其溶解充分；将此溶液用截留分子量3500Da的透析膜置于适量纯化水中透析10～20h透析充分，保留膜内液；

(5)酶解：用盐酸溶液将膜内液调节pH至3.5～5.0，加入药材量0.1％～0.5％的酸性蛋白酶，40～60℃酶解2～4h，酶解过程中通过加入适量的酸碱使酶解液的pH值稳定；酶解结束后，用NaOH溶液调节酶解后溶液pH至6.5～7.5，加入药材量0.1％～0.5％的中性蛋白酶或木瓜蛋白酶，40～60℃酶解2～4h，酶解过程中通过加入适量的酸碱使酶解液的pH值稳定；酶解结束后，溶液煮沸灭酶；

(6)第二次透析：将上述酶解液用截留分子量2000Da的透析膜置于适量纯化水中透析10～20h至透析充分，保留膜外液；

(7)离子交换树脂脱盐：将上述第二次透析液通过混合床离子交换树脂脱盐，树脂为Amberlite MB20型混合离子交换树脂或732阳离子交换树脂与D301-G型阴离子交换树脂按照2∶3配制的混合树脂，过柱速度为8～15倍柱体积/h，树脂用量为葛根药渣重量的1/30～1/10，下柱流出液浓缩后真空干燥粉碎，得葛根多肽提取物。

2.如权利要求1所述的一种使用葛根药渣制备葛根多肽提取物的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述过筛时的目数为30～60目。

3.如权利要求1所述的一种使用葛根药渣制备葛根多肽提取物的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述干燥的方法为将滤渣中残留的乙醇置于50～60℃鼓风干燥箱中烘干或自然晾干。

4.如权利要求1所述的一种使用葛根药渣制备葛根多肽提取物的方法，其特征在于，所述步骤(3)中，放入4℃冰箱静置12h。

5.如权利要求1所述的一种使用葛根药渣制备葛根多肽提取物的方法，其特征在于，所述步骤(5)中，所述煮沸灭酶的时间为10～15min。

6.一种葛根多肽提取物，其特征在于，采用如权利要求1～5任意一项所述的一种使用葛根药渣制备葛根多肽提取物的方法制备得到。