[发明专利]一种定量检测肺炎球菌多糖含量的免疫学检测方法

权利要求书

1.一种定量检测肺炎球菌多糖含量的免疫学检测方法，包括如下步骤：

(1)配置双光径免疫浊度分析仪的冲洗液；

所述双光径免疫浊度分析仪的冲洗液由包括3-环己胺-2-羟基丙磺酸(CAPSO)配置而成；

(2)采用所述冲洗液冲洗双光径免疫浊度分析仪，然后用其测定至少4个不同浓度的所述肺炎球菌多糖标准品溶液的吸光度，检测时所述肺炎球菌多糖标准品溶液放置在样本区、血清加入UDR试剂盒后放在试剂区；以所述吸光度为纵坐标，以所述肺炎球菌多糖标准品溶液的浓度为横坐标，建立所述肺炎球菌多糖标准品溶液的标准曲线；

(3)在步骤(2)相同的条件下，测定待测样品溶液的吸光度，检测时所述待测样品溶液放置在样本区、血清加入UDR试剂盒后放在试剂区；采用步骤(2)中所述标准曲线计算，得到所述待测样品溶液中肺炎球菌多糖的浓度，以得到待测样品中肺炎球菌多糖的含量。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述双光径免疫浊度分析仪的型号为IMMAGE 800；

所述冲洗液由包括NaCl、所述3-环己胺-2-羟基丙磺酸(CAPSO)和NaoH配置而成。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：配制的1000ml所述冲洗液中，所述NaCl的用量为4～5g；所述3-环己胺-2-羟基丙磺酸的用量为2～3g，所述NaoH的含量调pH值为8.0～10.5。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于：步骤(2)和(3)中测定吸光度采用的波长为530～670nm。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其特征在于：步骤(2)和(3)中测定吸光度采用的检测模式为速率散射模式。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其特征在于：步骤(2)和(3)中测定吸光度采用的光源为激光光源。

所述肺炎球菌多糖标准品溶液的浓度范围是1.25～25μg/ml。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其特征在于：采用所述双光径免疫浊度分析仪检测吸光度的方法，包括如下步骤：1)打开所述双光径免疫浊度分析仪，采用所述冲洗液冲洗反应杯；

2)装载贝克曼自带缓冲液和载贝克曼自带稀释液；

3)在所述双光径免疫浊度分析仪的自定义主界面选择所述检测模式，设定所述肺炎球菌多糖标准品、血清、所述贝克曼自带缓冲液进样体积，增益系数以及反应时间；

4)装载不同浓度的所述肺炎球菌多糖标准品溶液与其相应的血清试剂，请求定标；

5)以不同浓度的肺炎球菌多糖标准品与其相应的吸光度在所述双光径免疫浊度分析仪上建立标准曲线；

6)在所述双光径免疫浊度分析仪上手动编辑所述待测样品的架子号、位置号、样品标号、进行检测；

7)在主屏幕下，选择结果Results，输入相关查询的架子号、样品标号，按F1显示结果(Display Results)，即得到所述待测样品中肺炎球菌多糖的含量。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：步骤3)中，设定的所述肺炎球菌多糖标准品进样体积为10～25μl；

所述血清进样体积为10～25μl；

所述缓冲液进样体积为200～300μl；

所述增益系数值为1～4；

所述反应时间为1～5min。

9.根据权利要求7或8所述的方法，其特征在于：步骤5)中，所述标准曲线R≥0.98～0.99。

10.根据权利要求1-9中任一项所述的方法，其特征在于：所述方法适用所述待测样品包括23个血清型的肺炎链球菌多糖疫苗里每型别多糖的定量检测。