[发明专利]一种诱导脂肪干细胞定向分化为人皮肤成纤维细胞的方法及用途

权利要求书

1.一种诱导脂肪干细胞定向分化为人皮肤成纤维细胞的方法，其特征在于包括以下步骤：（1）、以分离的三代人脂肪干细胞为原材料，对其构建基于3D-MTC的超分辨生物力学平台中并进行培养；

具体构建方法为：（a）对视野下的椭圆形细胞确定范围，围绕细胞作一个能将细胞全部包含的面积最小的椭圆，以该椭圆长轴为细胞的长轴，建立相应的二维平面；

（b）设定平行于细胞长轴方向为二维坐标系的长轴，垂直于细胞长轴方向为短轴，加力方向与长轴之间的角度为θ；

（c）在上述的二维坐标的基础上构建三维坐标模型，对细胞在不同角度进行加力，构建多模态三维生理力学信号模型；

（d）在脂肪干细胞的表面粘附磁球，然后磁化器产生脉冲，沿着与细胞平面垂直的Z轴方向对黏附在细胞表面的磁球进行磁化，每隔一定时间需要对磁球进行重新磁化，以维持其磁场强度和方向不变；

（e）对磁球施加与细胞长轴成0~90°角度的正弦外磁场，磁球在外加磁场的作用下产生力矩，并施加在以绿色荧光蛋白标记的三代人脂肪干细胞的表面；具体通过电流控制外加磁场，从而实现对于细胞所施加力学刺激进行精确控制；

（2）、通过基于3D-MTC的超分辨生物力学平台对脂肪干细胞施加力学刺激，通过改变力学信号的参数设置，调控ADSCs向皮肤成纤维细胞定向分化；具体的力学刺激信号参数为：频率： 1~3 Hz；幅度： 30%；强度： 12 kPa；加力时间： 8 hours/d；加力角度： 90°；加力方式：正弦波。