[发明专利]一种快速提取生物DNA的样品处理方法、提取试剂盒及提取装置

说明书

本发明提供一种生物样品处理方法，用于生物组织DNA的快速提取，包括：样品的简单处理后，经过研磨仪的研磨，把处理后的生物组织样品转入DNA裂解液，加入异丙醇形成纳米DNA，转入DNA微柱，清洗和洗脱。本发明提供的一种生物样品处理方法，用于生物组织DNA的快速提取，可大大缩短操作时间，简化操作步骤，提高实验效率，且不使用有毒试剂，有利于操作者健康，减少对环境的破坏。

【技术领域】

本发明属于生物工程技术领域，具体地涉及一种生物组织DNA快速提取样品处理方法、提取试剂盒及提取装置。

【背景技术】

随着基因组测序技术的发展，生物基因组的序列、结构和功能研究飞速发展，而获得高纯度、高含量和高完整度的生物基因组DNA是基因组测序技术得以应用的首要前提。

传统的生物基因组DNA提取方法主要有CTAB和SDS法，提取步骤主要包括生物组织在液氮保护下研磨或者在Protein K处理下，以及之后的细胞裂解、去除杂质、DNA沉淀、漂洗和洗脱等过程。其主要是以CTAB或SDS等去污剂对细胞进行裂解后，释放出细胞中的基因组 DNA；再通过氯仿和苯酚抽提或高盐沉淀的方法，去除蛋白质、多酚和多糖等杂质；然后在提取的上清液中加入适量体积的无水乙醇、异丙醇或PEG等有机溶剂将DNA沉淀或吸附在硅胶柱、离子交换柱等介质上；最后用漂洗液进行漂洗后，用低浓度盐溶液溶解或从介质上洗脱下来。

专利文献CN 110592072A公开了一种植物基因组DNA的提取方法及其应用，包括在液氮保护下进行生物组织的研磨，并将生物组织粉末加入65℃的CTAB裂解液中温育40分钟，之后进行DNA抽提，全部操作时间超过2.5小时，并且需要用到β-巯基乙醇等有毒物质。

专利文献CN 110358762A公开了一种提取植物叶片基因组DNA的方法，包括将植物叶片放入多通道均质器中破碎，在裂解液中65℃温育45分钟，再通过磁珠法提取DNA，全部操作时间不少于1小时，并且需要β-巯基乙醇和盐酸胍等有毒物质，对于仪器的要求较复杂。

专利文献CN 110592072 A公开了一种植物基因组DNA的提取方法及其应用，包括在液氮保护下进行植物组织的研磨，并将植物组织粉末加入含有SDS的裂解液种中，在65℃温育30～ 50分钟。还要在-20℃放置5～10分钟，之后进行DNA抽提，全部操作时间大约2小时，并且需要用到β-巯基乙醇的有毒物质。

专利文献CN 106754889 A公开了从一种中药植物组织提取高质量基因组DNA的方法，包括在低温下对植物组织细胞核反复抽提。然后，加入蛋白酶K和SDS裂解液并37℃消化过夜，耗时太长。而且使用了酚和氯仿有毒物质。

专利文献CN 104694530 A公开了一种用96孔板的研磨仪从小麦叶片组织提取高质量基因组DNA的方法，包括低温样品处理，研磨，然后用提取试剂完成DNA的提取过程。但是样品处理过程太耗时：20～28h，提取过程也非常费时，超过2h，而且还使用有毒物质，如：氯仿，苯酚等。

通过上述专利文献可见，现有的生物组织DNA提取方法普遍存在操作时间长(普遍超过 1小时甚至2小时)、使用有毒物质(酚、氯仿、β-巯基乙醇)等问题，操作时间长会引起DNA的降解且浪费实验人员的宝贵时间、降低实验效率；使用有毒物质则会对操作者身心健康造成伤害，且废物排放对环境有不利影响，后期处理成本大，不符合可持续发展的需要。

【发明内容】

本发明的目的在于克服上述现有技术中存在的不足，提供一种能够快速提取生物组织DNA 的样品处理方法，以及用于实施该方法的试剂盒和提取装置。

为实现上述目的，本发明提供一种生物组织DNA快速提取的样品处理方法，包括以下步骤：

(a)将将简单处理后的生物组织加入研磨装置或研磨仪；

(b)对所述生物组织进行充分的研磨；