[发明专利]一种猪流感病毒的检测引物及其试剂盒在审
申请号: | 202011070178.5 | 申请日: | 2020-10-10 |
公开(公告)号: | CN114317813A | 公开(公告)日: | 2022-04-12 |
发明(设计)人: | 钱学庆;秦炜;宋成林;贺笑非;吴小虎;胡雄敏;崔丹;杨觐瑜;赵垠莹;侯隽杰 | 申请(专利权)人: | 上海润达榕嘉生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11 |
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地址: | 201900 上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 种猪 流感病毒 检测 引物 及其 试剂盒 | ||
1.一种猪流感病毒的检测引物,其特征在于,所述检测引物包括猪流感病毒的正向引物、反向引物以及扩增探针引物,所述猪流感病毒引物序列来源于国际PubMed数据库中猪流感病毒基因组34-54和115-135碱基,基因组编号NCBI编码为FJ966975。
2.根据权利要求1所述检测引物,其特征在于,所述正向引物及反向引物位于猪流感病毒基因34-54和115-135碱基,其序列如SEQ ID NO:001和SEQ ID NO:002所示,所述扩增探针引物位于猪流感病毒基因66-84碱基,其序列如SEQ ID NO:003所示。
3.根据权利要求1所述检测引物,其特征在于,所述检测引物的使用方法:
1)提取样品RNA;
2)RNA反转录为cDNA;
3)利用SEQ ID NO:001-003所示的正、反向扩增引物及扩增探针引物,对步骤2)所述cDNA样品利用芯片PCR扩增仪进行扩增,获得猪流感病毒的扩增产物;
4)利用生物芯片阅读仪对步骤3)所述扩增产物进行扫描和分析,获得所述扩增产物的拷贝值。
4.一种检测猪流感病毒的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1-3任一权利要求所述的检测引物。
5.根据权利要求4所述猪流感病毒的检测试剂盒,其特征在于,所述检测试剂盒包括样品RNA抽提试剂、RNA反转录试剂、无水乙醇、检测体系PCR反应液、阳性对照品、阴性对照品;
其中检测体系PCR反应液包括:1对扩增引物和1条探针引物,序列如SEQ ID NO:001-003所示。
6.根据权利要求4所述试剂盒,其特征在于,所述检测体系PCR反应液还包括:2xMultiplex PCR Plus Buffer;dNTP Mix;HotStar Taq Plus DNA Polymerase。
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