[发明专利]FRT细胞株在制备筛选Chrm3调节剂的制剂或试剂盒中的应用在审
申请号: | 202011073293.8 | 申请日: | 2020-10-09 |
公开(公告)号: | CN112359136A | 公开(公告)日: | 2021-02-12 |
发明(设计)人: | 郑锴;郝峰;李欣;王坤;胡城;解宇浩;张嘉琪 | 申请(专利权)人: | 吉林医药学院 |
主分类号: | C12Q1/6897 | 分类号: | C12Q1/6897;C12Q1/02 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 张柳 |
地址: | 132000 吉林*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | frt 细胞株 制备 筛选 chrm3 调节剂 制剂 试剂盒 中的 应用 | ||
1.FRT细胞株在制备筛选Chrm3调节剂的制剂或试剂盒中的应用;
所述FRT细胞株中ANO1和YFP-H148Q/I152L共表达;
所述FRT细胞株通过荧光信号反应细胞内Ca2+浓度的变化进而筛选Chrm3调节剂;
所述荧光信号为相对荧光强度变化值/slope值/斜率值,所述相对荧光强度变化值/slope值/斜率值与Chrm3调节剂浓度成剂量依赖关系;
其中,相对荧光强度变化值/slope值/斜率值与细胞内Ca2+浓度呈现良好的正相关;
所述相对荧光强度变化值/slope值/斜率值计算如下:
0s~1.4s的相对荧光值的平均值;
y:2.4s~14.8s与0.6s~13s做线性回归分析所得到的线性回归的结果。
2.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述Chrm3调节剂包括激活剂或抑制剂;所述激活剂包括pilocarpine、choline或CCh中的一种或多种;所述抑制剂包括4-DAMP或p-F-HHSiD。
3.FRT细胞株在制备预防和/或治疗与Chrm3相关疾病的药物中的应用;所述FRT细胞株中ANO1和YFP-H148Q/I152L共表达;
所述FRT细胞株通过荧光信号反应细胞内Ca2+浓度的变化进而筛选Chrm3调节剂;
所述荧光信号为相对荧光强度变化值/slope值/斜率值,所述相对荧光强度变化值/slope值/斜率值与Chrm3调节剂浓度成剂量依赖关系;
其中,相对荧光强度变化值/slope值/斜率值与细胞内Ca2+浓度呈现良好的正相关;
所述相对荧光强度变化值/slope值/斜率值计算如下:
0s~1.4s的相对荧光值的平均值;
y:2.4s~14.8s与0.6s~13s做线性回归分析所得到的线性回归的结果。
4.如权利要求3所述的应用,其特征在于,所述与Chrm3相关疾病包括干燥综合征、心脏成纤维细胞增殖和胶原蛋白分泌、膀胱过度活动症、呼吸道疾病、慢性阻塞性肺疾病、肠易激综合征、结肠癌、胆管癌对神经周围的侵袭和转移中的一种或多种。
5.筛选Chrm3调节剂的制剂或试剂盒,其特征在于,包括FRT细胞株以及可接受的助剂;所述FRT细胞株中ANO1和YFP-H148Q/I152L共表达;
所述FRT细胞株通过荧光信号反应细胞内Ca2+浓度的变化进而筛选Chrm3调节剂;
所述荧光信号为相对荧光强度变化值/slope值/斜率值,所述相对荧光强度变化值/slope值/斜率值与Chrm3调节剂浓度成剂量依赖关系;
其中,相对荧光强度变化值/slope值/斜率值与细胞内Ca2+浓度呈现良好的正相关;
所述相对荧光强度变化值/slope值/斜率值计算如下:
0s~1.4s的相对荧光值的平均值;
y:2.4s~14.8s与0.6s~13s做线性回归分析所得到的线性回归的结果。
6.预防和/或治疗与Chrm3相关疾病的药物,其特征在于,采用FRT细胞株筛选获得;所述FRT细胞株中ANO1和YFP-H148Q/I152L共表达;
所述FRT细胞株通过荧光信号反应细胞内Ca2+浓度的变化进而筛选Chrm3调节剂;
所述荧光信号为相对荧光强度变化值/slope值/斜率值,所述相对荧光强度变化值/slope值/斜率值与Chrm3调节剂浓度成剂量依赖关系;
其中,相对荧光强度变化值/slope值/斜率值与细胞内Ca2+浓度呈现良好的正相关;
所述相对荧光强度变化值/slope值/斜率值计算如下:
0s~1.4s的相对荧光值的平均值;
y:2.4s~14.8s与0.6s~13s做线性回归分析所得到的线性回归的结果。
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