[发明专利]一种抗西尼罗河病毒的人源中和性抗体

说明书

本发明公开了一种抗西尼罗河病毒的人源中和性抗体，该抗体的特异性结合抗原是WNV E蛋白的第三结构域，包括轻链CDR1、轻链CDR2、轻链CDR3、重链CDR1、重链CDR2和重链CDR3。本发明的单克隆抗体具有较强的病毒中和活性，可作为临床抗WNV药物的候选。

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及抗病毒抗体，具体涉及一种抗西尼罗河病毒的人源中和性抗体。

背景技术

西尼罗病毒(West Nile virus，WNV)属黄病毒科黄病毒属，为单股正链RNA病毒，与圣路易斯脑炎病毒(Saint-Louis encephalitis virus)和墨累河谷热病毒(MurrayValley fever virus)同属日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus，JEV)血清群，可引起人和动物发生西尼罗河热和西尼罗病毒脑膜脑炎，库蚊属的蚊子是其主要的传播媒介，鸟类是该病毒的中间宿主，而人和马则是终端宿主。WNV病广泛分布于非洲、中东、欧洲的部分地区。1999年夏季，WNV首次登陆美国，随后几年内在北美和中美洲迅速传播，导致美国和加拿大等国家历史上虫媒病毒感染的最大流行。虽然我国至今没有WNV疫情发生，但周边国家和地区己经爆发该疫病，随时有输入性传播的可能，而且作为一种潜在的生物战剂，存在被用于生物恐怖袭击的可能，加强相关领域的技术储备，对于我国的公共卫生及生物安全保障具有重要意义。

WNV抗原的检测可以通过细胞培养分离技术和噬斑滴定、传统的RT-PCR、实时荧光RT-PCR和免疫组织化学等方法进行。其中RT-PCR和实时荧光RT-PCR可以快速检测病毒抗原，但该方法成本昂贵，容易出现由于样品污染而呈假阳性结果；通过细胞培养技术分离病毒和检测样品中的病毒噬斑也可以检测病毒抗原，但该方法检测周期长，且需要专业的技术人员以及BSL-3生物安全试验室，因而在大范围检测中难以普及；而利用抗原捕获ELISA、间接免疫荧光、免疫组化等方法可以快速、灵敏地检测WNV抗原，适于在大规模的监测系统中应用。抗原捕获ELISA、间接免疫荧光、免疫组化等检测方法的应用依赖于针对WNV抗原特异性的单克隆抗体的研制。

西尼罗病毒粒子表面有两个膜蛋白：M蛋白和E蛋白。其中E蛋白是主要的膜蛋白，与病毒和受体细胞的识别、结合和病毒的毒力有关。晶体结构分析表明E蛋白包含三个结构域：即结构域I、II和III，其中结构域III(EDIII)被认为是诱导病毒特异性抗体和中和抗体的主要抗原表位。本申请的研究目的是开发以EDIII作为抗原表位的抗WNV的中和抗体。

发明内容

本发明的主要目的在于提供一种单克隆抗体，所述单克隆抗体是以西尼罗病毒的E蛋白第三结构域作为抗原制备而成。

为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

本发明第一方面，提供了一种单克隆抗体或其抗原结合片段，所述单克隆抗体或其抗原结合片段包括轻链CDR1、轻链CDR2、轻链CDR3、重链CDR1、重链CDR2和重链CDR3；

重链CDR1具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列；

重链CDR2具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列；

重链CDR3具有SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列；

轻链CDR1具有SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列；

轻链CDR2具有SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列；

轻链CDR3具有SEQ ID NO:7所示的氨基酸序列。

在一优选例中，所述单克隆抗体的重链可变区具有SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列；所述单克隆抗体的轻链可变区具有SEQ IDNO:8所示的氨基酸序列。

本发明的单克隆抗体，其重链类型可以为IgG1、IgG2、IgG3或Ig4。