[发明专利]一种氟尼辛人工抗原及其制备方法与应用有效
| 申请号： | 202011077631.5 | 申请日： | 2020-10-10 |
| 公开（公告）号： | CN114316027B | 公开（公告）日： | 2023-09-05 |
| 发明（设计）人： | 温凯;王战辉;沈建忠;于雪芝;余文博;米佳飞;张素霞;史为民 | 申请（专利权）人： | 中国农业大学 |
| 主分类号： | C07K14/765 | 分类号： | C07K14/765;C07K14/77;C07K14/795;C07K1/107;C07K16/44;G01N33/558 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 商秀玲 |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 氟尼辛 人工 抗原 及其 制备 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.制备氟尼辛特异性抗血清的方法，包括以下步骤：
（1）氟尼辛免疫原与等量弗氏佐剂混合乳化免疫小鼠；
（2）初次免疫使用弗氏完全佐剂，加强免疫使用弗氏不完全佐剂，免疫剂量250 μg/只，免疫间隔为8周；免疫次数3次；
所述氟尼辛免疫原的制备方法，包括如下步骤：
1）将10-30 mg氟尼辛、10-40 mg EDC.HCL和10-40 mg NHS溶于0.2-2 mL DMF中，搅拌反应4-48小时，得到A液；
2）将10-70 mg血蓝蛋白溶于10 mL浓度为0.01 M，pH为7.4的磷酸盐缓冲液中得到B液；
3）将A液逐滴加入到B液中，室温搅拌，过夜反应；
4）将上述反应液在PBS中透析1-3天，得到氟尼辛免疫原；
所述氟尼辛免疫原为式I所示，其中K为血蓝蛋白；
式I；
（3）每次免疫后第7天，尾静脉采血，4000 rpm离心10 min，收集上清液，即为氟尼辛特异性抗血清。
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