[发明专利]AOX特异性抗体组合及其制备方法和用途

权利要求书

1.AOX特异性抗体组合的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1，目的基因序列的合成，所述目的基因分别为SEQ ID NO.1-SEQ ID NO.4，所述目的基因SEQ ID NO.1-SEQ ID NO.4对应的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.5-SEQ ID NO.8所示；

S2，将S1合成的目的基因SEQ ID NO.1通过EcoRI和XhoI双酶切连接构建到大肠杆菌表达载体pGEX4T.3载体上，然后通过在大肠杆菌中诱导蛋白表达，获得AOX与GST的融合蛋白，标记为GST-AOX1a；

S3，将S2获得的GST-AOX1a蛋白进行提纯；

S4，将S3中提纯的蛋白注射到兔子体内，进行4次免疫后，分离血清，获得AOX特异性抗体AOX1a；

S5，分别合成目的基因SEQ ID NO.2-SEQ ID NO.4，然后参照S2-S4的方法制备相应的AOX特异性抗体AOX1b/c，AOX1d，AOX2。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，S2中，蛋白诱导条件为：23℃，10h，0.1mMIPTG。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，4次免疫方法如下：

初次免疫，每只兔子注射200μg蛋白；蛋白与等体积弗氏完全佐剂混合，在5mL离心管中涡旋震荡2-3h乳化，乳化蛋白进行背部皮下多点注射，每两周加强免疫一次，剂量为100μg，加强免疫选用弗氏不完全佐剂，最后一次免疫后，7到10天之内心脏抽血，并分离血清，获得AOX特异性抗体。