[发明专利]一种灭活疫苗佐剂白油检验方法

说明书

本发明提供一种灭活疫苗佐剂白油检验方法，其中确定白油样品是否合格的标准，是碳链正构烷烃C15～C20和值标准为46.28～58.36％。本发明所提供的检测方法，是将将待检测的白油样品使用有机溶剂进行稀释，作为待检测的油样；然后将油样放入气相色谱仪中进行检测，通过气相色谱仪的数据分析系统对结果进行整理及分析,对C15‑C20正构烷烃含量进行和值分析,确定白油是否在标准规定范围内。本发明所建立的检测方法和检测标准能准确分析出各种厂家及白油类型的内在差异，分析出以C14‑C24正异构烷烃出峰时间及含量，在研究白油组分上有显著的成效，该研究为对灭活疫苗佐剂白油检验提供基础。

技术领域

本发明属于疫苗佐剂检验技术领域，具体涉及一种灭活疫苗佐剂白油检验方法。

背景技术

动物疫苗用油乳佐剂，是一种先于或与抗原同时使用，能够增强机体的非特异性免疫能力及抗原的免疫原性，而自身不具备抗原特性的物质。油乳佐剂疫苗是使用矿物油和乳化剂作为免疫增强剂的疫苗，该类佐剂能使抗原在注射部位持续稳定释放，为抗原在淋巴系统中转运提供载体，增加单核细胞的形成和聚集，提高疫苗的免疫效力，是目前国内外疫苗市场上产品最多的类型之一。随着禽流感等流行病在全球范围内的流行,生产免疫效果好的灭活疫苗的需求日益迫切。随着抗原纯度越来越高,亚单位疫苗、合成肽疫苗等被广泛应用，佐剂增强抗原的免疫原性的作用显得尤为重要。

油乳佐剂可以使多种抗原产生高滴度抗体,是动物疫苗中应用最广泛的佐剂之一。作为油乳佐剂的主要原料,白油的组分及其乳化稳定性对疫苗的活性有着重要影响。

白油，是碳氢化合物，成分除含量极其微小的杂质除外，均为碳和氢两种元素，一般动物疫苗生产使用的白油碳链维持在19碳左右。

白油的品质对于疫苗的免疫效果具有一定的影响，一款好的白油不仅需要检验其理化指标，其内在组分也是重中之重，因此开发一种检验检验白油组分的方法对于白油在疫苗方面的应用至关重要。

发明内容

本发明的目的是提供一种灭活疫苗佐剂白油检验方法，能够有效的检验佐剂注射用白油的质量，从而弥补现有技术的不足。

本发明首先提供一种用于确定疫苗注射用佐剂白油质量的标准，所述的标准，是碳链正构烷烃C15～C20和值标准为46.28～58.36％；

本发明还提供一种检测疫苗佐剂白油的方法，包括如下的步骤：

1)将待检测的白油样品使用有机溶剂进行稀释，作为待检测的油样；

所述的有机溶剂，在一个实施例中的具体记载为正己烷；

所述的正己烷与待检测的白油样品的体积比，优选为100:1；

2)将步骤1)所获得的油样放入气相色谱仪中进行检测，其中色谱柱为5％苯基-甲基聚硅氧烷毛细管柱色谱柱；色谱条件如下：起始温度为50℃，进样量为0.1μl，以每分钟10℃的速率升温至100℃，再以每分钟5℃的速率升温至320℃，维持9分钟；进样口温度为350℃；检测器温度为350℃；

所述的色谱柱的标准如下：0.32mm×30mm，膜厚度0.25μm；

3)通过气相色谱仪的数据分析系统对结果进行整理及分析,分析出C8-C40正异构烷烃出峰时间及含量,并对C15-C20正构烷烃含量进行和值分析,确定白油是否在标准规定范围内；如C15-C20正构烷烃的值标准为46.28～58.36％，则待检测的白油为合格白油。

本发明所建立的检测方法和检测标准能准确分析出各种厂家及白油类型的内在差异，分析出以C14-C24正异构烷烃出峰时间及含量，在研究白油组分上有显著的成效，该研究为对灭活疫苗佐剂白油检验提供基础。

附图说明

图1：23种正构烷烃混标C8-C40出峰时间及含量数据图；