[发明专利]芫花外植体培养繁育方法用培养基及芫花外植体培养繁育方法

权利要求书

1.一种用于芫花外植体培养繁育方法的培养基，由诱导培养基、增殖培养基和生根培养基组成，该三种培养基分别配制且依次用于芫花组培苗繁育方法的初代培养步骤、继代培养步骤和生根培养步骤，其特征在于：

所述诱导培养基中按照比例加入下列物质，使得各物质浓度分别为花宝1号1g/L、花多多1号1g/L、6-苄氨基嘌呤2.3～2.7mg/L、萘乙酸0.3～0.7mg/L、鲜榨椰子汁100ml/L、蔗糖30g/L和琼脂6g/L，调节溶液pH值为5.85；

所述增殖培养基中按照比例加入下列物质，使得各物质浓度分别为花宝1号1g/L、花多多1号1g/L、6-苄氨基嘌呤0.1～0.5mg/L、鲜榨椰子汁100ml/L、蔗糖30g/L和琼脂6g/L，调节溶液pH值为5.85；

所述生根培养基以MS培养基为基础，按照比例加入下列物质，使得各物质浓度分别为萘乙酸0.8～1.2mg/L、蔗糖15g/L、活性炭0.5g/L和琼脂6g/L，调节溶液pH值为5.85。

2.根据权利要求1所述的用于芫花外植体培养繁育方法的培养基，其特征在于：所述诱导培养基中按照比例加入下列物质，使得各物质浓度分别为花宝1号1g/L、花多多1号1g/L、6-苄氨基嘌呤2.5mg/L、萘乙酸0.5mg/L、鲜榨椰子汁100ml/L、蔗糖30g/L和琼脂6g/L，调节溶液pH值为5.85。

3.根据权利要求2所述的用于芫花外植体培养繁育方法的培养基，其特征在于：所述增殖培养基中按照比例加入下列物质，使得各物质浓度分别为花宝1号1g/L、花多多1号1g/L、6-苄氨基嘌呤0.3mg/L、鲜榨椰子汁100ml/L、蔗糖30g/L和琼脂6g/L，调节溶液pH值为5.85。

4.根据权利要求3所述的用于芫花外植体培养繁育方法的培养基，其特征在于：所述生根培养基以MS培养基为基础，按照比例加入下列物质，使得各物质浓度分别为萘乙酸1.0mg/L、蔗糖15g/L、活性炭0.5g/L和琼脂6g/L，调节溶液pH值为5.85。

5.一种芫花外植体培养繁育方法，其特征在于，应用权利要求1-4任一项所述的芫花外植体培养方法用培养基，包括以下步骤：

S1：外植体选择，选用当年生春季嫩稍枝芽饱满的半木质化枝条茎段尖端 5～15cm长的部分作为外植体；

S2：外植体消毒，将外植体的叶片剪去，清水洗净后，消毒液浸泡，浸泡完成后将外植体取出放入无菌水中漂洗，得到消毒完成后的外植体；

S3：初代培养，将消毒完成后的外植体接种到诱导培养基中，培养至外植体萌芽；

S4：继代培养，将外植体萌芽转接到增殖培养基中，培养至生长出丛生芽；

S5：生根培养，取2～3 cm的丛生芽的顶芽，接种入生根培养基，培养至诱导出根须，得到无菌种苗。

6.根据权利要求5所述的芫花外植体培养繁育方法，其特征在于：所述步骤S3、步骤S4和步骤S5中培养条件均为，每天先于光照强度1500Lx条件下光照16h，温度为25℃；然后于黑暗条件下培养8h，温度为23℃。

7.根据权利要求6所述的芫花外植体培养繁育方法，其特征在于：所述步骤S2中的消毒液由商品漂白水和无菌水按1:4的比例配制而成。