[发明专利]芫花外植体培养繁育方法用培养基及芫花外植体培养繁育方法

说明书

本申请涉及芫花种苗繁育领域，具体公开了一种用于芫花外植体培养繁育方法的培养基及芫花外植体培养繁育方法。其培养基由诱导培养基、增殖培养基和生根培养基组成，各个培养基为花宝1号、花多多1号、6‑苄氨基嘌呤、萘乙酸、鲜榨椰子汁、蔗糖和琼脂等制备而成。本申请的芫花组培苗繁育方法为选用当年生春季嫩稍枝芽饱满的半木质化枝条茎尖作为外植体，进行消毒后分阶段置于诱导培养基中萌芽、增殖培养基中培养丛生芽、再于生根培养基中生根，直至培养出无菌种苗后，再驯化培养得到可用于工厂生产的正常种苗。其具有增殖倍率高、生根率达到95%以上的效果，适宜大规模生产芫花种苗。

技术领域

本申请涉及芫花繁育领域，更具体地说，它涉及一种芫花外植体培养繁育方法用培养基及芫花外植体培养繁育方法。

背景技术

芫花(Daphne genkwa Sieb.et Zucc)，别名：药鱼草、闹鱼花、头痛花、闷头花、蜀桑等。瑞香科、瑞香属落叶灌木，高0.3～1米，多分枝；树皮褐色，无毛；小枝圆柱形，细瘦，干燥后多具皱纹，幼枝黄绿色或紫褐色，密被淡黄色丝状柔毛，老枝紫褐色或紫红色，无毛。为我国具有药用价值的乡土植物，近年来由于其花色艳丽，常被采挖培育成园艺作物。

常规的种苗繁育方法为种子扦插繁殖和分株繁殖，利用植物组织培养的方式进行种苗繁育未见报道。但是种子播种或分株繁殖，存在生产周期极其漫长，且不能规模化生产的问题。

发明内容

为了缩短芫花繁殖周期，提高量产效率，降低生产成本，本申请提供一种芫花外植体培养繁育方法用培养基及芫花外植体培养繁育方法。

第一方面，本申请提供一种芫花外植体培养繁育方法用培养基，采用如下的技术方案：一种芫花外植体培养繁育方法用培养基，由诱导培养基、增殖培养基和生根培养基组成，该三种培养基分别配制且依次用于芫花外植体培养繁育方法的初代培养步骤、继代培养步骤和生根培养步骤，

所述诱导培养基中按照比例加入下列物质，使得各物质浓度分别为花宝1号1g/L、花多多1 号1g/L、6-苄氨基嘌呤2.3～2.7mg/L、萘乙酸0.3～0.7mg/L、鲜榨椰子汁100ml/L、蔗糖30g/L 和琼脂6g/L，调节溶液pH值为5.85；

所述增殖培养基中按照比例加入下列物质，使得各物质浓度分别为花宝1号1g/L、花多多1 号1g/L、6-苄氨基嘌呤0.1～0.5mg/L、鲜榨椰子汁100ml/L、蔗糖30g/L和琼脂6g/L，调节溶液pH值为5.85；

所述生根培养基以MS基本培养基为基础，按照比例加入下列物质，使得各物质浓度分别为萘乙酸0.8～1.2mg/L、蔗糖15g/L、活性炭0.5g/L和琼脂6g/L，调节溶液pH值为5.85。

通过采用上述技术方案，花宝1号和花多多1号为花用肥料，富含各种化学营养成分和微量元素，但不含蔗糖和琼脂，适合植物成长及根、茎强壮用；MS培养基为Murashige和Skoog研制的通用培养基，具有较高的无机盐浓度，为组织生长提供充足的矿物质营养并加速愈伤组织的生长；椰汁中含有多种氨基酸，用来提供植物所需营养；萘乙酸有助于植物生根；6-苄氨基嘌呤是一种细胞分裂素，促进芽的形成；蔗糖作为碳源提供能量；琼脂起固定作用，为植物提供养料。在含有以上物质的培养基中，可以快速促进腋芽萌发，诱导产生丛生芽，进而生根后成长为无根苗，最后形成无菌有根苗。

可选的，所述诱导培养基中按照比例加入下列物质，使得各物质浓度分别为花宝1号 1g/L、花多多1号1g/L、6-苄氨基嘌呤2.5mg/L、萘乙酸0.5mg/L、鲜榨椰子汁100ml/L、蔗糖 30g/L和琼脂6g/L，调节溶液pH值为5.85。

通过采用上述技术方案，当诱导培养基中6-苄氨基嘌呤含量为2.5mg/L且萘乙酸含量为0.5mg/L时，萌芽生长的效果较佳。