[发明专利]一种多肽固液组合合成丙氨瑞林的方法

权利要求书

1.一种多肽固液组合合成丙氨瑞林的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)、用多肽固相合成法合成化合物1：

Boc-Pglu-His(Boc)-Trp(Boc)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Ala-Leu-OH；

2)、用多肽液相合成法合成化合物2：H-Arg(pbf)-Pro-NHEt；

3)、在液相中合成化合物3：

Boc-Pglu-His(Boc)-Trp(Boc)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Ala-Leu-Arg(pbf)-Pro-NHEt；

4)、合成丙氨瑞林粗品：Pglu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ala-Leu-Arg-Pro-NHEt。

2.根据权利要求1所述的一种多肽固液组合合成丙氨瑞林的方法，其特征在于：步骤1)中，化合物1可以通过固相法从C到N末端的顺序合成，其步骤包括：

1)：以CTC树脂为固相载体；

Boc-Pglu-OH，Fmoc-His(Boc)-OH，Fmoc-Trp(Boc)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Tyr(tBu)-OH，Fmoc-D-Ala-OH，Fmoc-Leu-OH为氨基酸单体；

缩合剂为HBTU、HATU、TATU、TBTU、PyBOP、BOP、DIC、DCC其中的一种；

脱帽试剂为哌嗪溶液，溶剂为偶极非质子溶剂，哌嗪溶液的质量浓度为2-5％；

有机碱为DIEA或NMM；

从C到N末端依次合成：

Boc-Pglu-His(Boc)-Trp(Boc)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Ala-Leu-CTC树脂；

2)：用三氟乙酸/二氯甲烷溶液切割，浓缩后用水析出，得到化合物1：

Boc-Pglu-His(Boc)-Trp(Boc)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Ala-Leu-OH。

3.根据权利要求1所述的一种多肽固液组合合成丙氨瑞林的方法，其特征在于：步骤2)中，化合物2可以通过液相法合成：

以Fmoc-Arg(pbf)-OH，H-Pro-NHEt·HCl为氨基酸单体、缩合剂为HBTU、HATU、TATU、TBTU、PyBOP、BOP、DIC、DCC其中的一种、活化剂为HOSu或HOBt，有机碱主要为DIEA或TEA或NMM，依次合成：

1)、Fmoc-Arg(pbf)-Pro-NHEt；

2)、H-Arg(pbf)-Pro-NHEt。

4.根据权利要求1所述的一种多肽固液组合合成丙氨瑞林的方法，其特征在于：步骤3)中，化合物3可以通过液相法合成：以化合物1和化合物2为合成片段、缩合剂为HBTU、HATU、TATU、TBTU、PyBOP、BOP、DIC、DCC等其中的一种、活化剂为HOSu或HOBt，有机碱主要为DIEA或TEA或NMM，合成化合物3：

Boc-Pglu-His(Boc)-Trp(Boc)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Ala-Leu-Arg(pbf)-Pro-NHEt；

化合物1和化合物2的摩尔比为1：1.01～1：1.5，化合物2和缩合剂、活化剂及有机碱的摩尔比＝1：1：1：1。

5.根据权利要求4所述的一种多肽固液片段合成丙氨瑞林的方法，其特征在于，使用后的树脂回收步骤如下：

1)将树脂用DMF洗涤；

2)甲醇洗涤，抽去滤液，真空干燥；

3)另配置二氯亚砜的DCM溶液，加入装有树脂的固相合成反应器中，反应2h后，抽去反应液，DCM洗涤。

6.根据权利要求1所述的一种多肽固液组合合成丙氨瑞林的方法，其特征在于，该丙氨瑞林粗品纯度可以达到90％以上，可以由化合物3溶于TFA溶液中进行反应得到，反应完成后浓缩，加入醚类试剂析出，过滤即得到丙氨瑞林粗品。