[发明专利]用于检测转基因玉米DBN9958的RPA引物探针组合、试剂盒及检测方法在审
申请号: | 202011092552.1 | 申请日: | 2020-10-13 |
公开(公告)号: | CN112301144A | 公开(公告)日: | 2021-02-02 |
发明(设计)人: | 宛煜嵩;孟丽霞 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院生物技术研究所 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/6844;C12N15/11 |
代理公司: | 北京知汇林知识产权代理事务所(普通合伙) 11794 | 代理人: | 董涛 |
地址: | 100081 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 检测 转基因 玉米 dbn9958 rpa 引物 探针 组合 试剂盒 方法 | ||
1.一种检测转基因玉米DBN9958的RPA引物探针组合,所述引物包括正向引物和反向引物,其特征在于,所述正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述反向引物R的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,所述探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
2.一种转基因玉米DBN9958的RPA检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1所述的引物探针组合。
3.一种转基因玉米DBN9958的RPA检测方法,其特征在于,包括如下步骤:
以待测样品的基因组DNA为模板,利用权利要求1的引物探针组合进行RPA扩增并进行荧光检测。
4.根据权利要求3所述的转基因玉米DBN9958的RPA检测方法,其特征在于,所述RPA扩增反应体系为每50μl反应体系中包括所述正向引物和反向引物各20pmol,探针5pmol,DNA模板50ng。
5.根据权利要求4所述的转基因玉米DBN9958的RPA检测方法,其特征在于,所述RPA扩增体系为总体系50μl,再水化缓冲液29.5μl,280μm M醋酸镁溶液2.5μl,余量为水。
6.根据权利要求3-5任一项所述的转基因玉米DBN9958的RPA检测方法,其特征在于,所述RPA扩增程序为39℃反应20分钟。
7.权利要求1所述的引物探针组合、权利要求2所述的检测试剂盒和/或权利要求3-6任一项所述的检测方法在检测转基因玉米DBN9958的种子资源中的应用。
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