[发明专利]LAMP联合检测甲型流感病毒、乙型流感病毒及新型冠状病毒的引物组、试剂盒及方法

说明书

本发明涉及一种LAMP联合检测甲型流感病毒、乙型流感病毒及新型冠状病毒的引物组、试剂盒以及方法，引物组包括：甲型流感病毒扩增引物、乙型流感病毒扩增引物及2019‑nCOV病毒扩增引物组，甲型流感病毒扩增引物的F3、B3、FIP、BIP序列依次如SEQ ID NO:5～SEQ ID NO:8所示，乙型流感病毒扩增引物的F3、B3、FIP、BIP序列依次如SEQ ID NO:9～SEQ ID NO:12所示，2019‑nCOV病毒扩增引物组由N基因扩增引物和ORF1ab基因扩增引物中的一组或两组组成，N基因引物的F3、B3、LF、LB、FIP、BIP序列依次如SEQ ID NO:13～SEQ ID NO:18所示，ORF1ab基因引物的F3、B3、FIP、BIP序列依次如SEQ ID NO:19～SEQ ID NO:22所示。操作简便，适应性好，单次检测可在1h内鉴定样本中是否存在甲型流感病毒、乙型流感病毒、2019‑nCOV病毒。

技术领域

本发明属于核酸检测技术领域，具体涉及一种LAMP联合检测甲型流感病毒、乙型流感病毒及新型冠状病毒的引物组、试剂盒及方法。

背景技术

流行性感冒病毒(Influenza virus)属于正粘病毒科(Orthomyxoviridae)，简称流感病毒，包括人流感病毒和动物流感病毒，人流感病毒分为甲(A)、乙(B)、丙(C)三型，是流行性感冒的病原体。其中甲型流感病毒可自然感染人和多种动物，常突然发生、传播迅速，多次引起世界性大流行。乙型流感病毒在自然情况下仅感染人，一般呈散发、爆发或小流行。

2019-nCOV属于冠状病毒科冠状病毒属，甲型流感、乙型流感和新型冠状病毒2019-nCoV 均为单链RNA病毒，在入侵人体后通过自身编码的RNA依赖RNA聚合酶RDRP直接进行 RNA复制并大量扩增。病毒病原体能刺激免疫系统，产生因子风暴，引起机体器官损害。病毒能引发呼吸道感染，出现发烧、咳嗽等相似症状，并且能通过空气飞沫等途径在人群中造成大面积传播。三者早期症状并不容易区分。因此，在有以上症状的患者中，若能通过核酸检测手段鉴别三个不同病原体，对于疾病控制，人民生命健康安全的保障具有重要意义。

传统的流感病毒和人冠状病毒的检测方法较多，但一般都存在一些缺陷，其中血清学检测、抗原检测检测时间短，要求低，但灵敏度不高同时容易造成假阳性，病毒分离和电镜检测耗时长，方法复杂，需要大型仪器及专业实验室，分子生物学检测是目前灵敏度较高的一种检测方法，针对上述三种病原的核酸检测主要有荧光定量PCR法、环介导恒温扩增法、基于重组酶介导恒温扩增法等，其中荧光定量PCR法检测通道多通量高，但需要依托荧光定量 PCR仪及专业实验室和检测人员，成本高，不利于推广。环介导恒温扩增法在恒定温度下能高效扩增核酸，摆脱了热循环的限制。

现有技术中，申请公布号为CN111057798A的发明专利，公开了一种检测新型冠状病毒的LAMP引物组合和试剂盒，同时公开了利用引物组和以及引物组使用环介导等温扩增方法检测新冠病毒的方法，但是无法同时检测甲型流感、乙型流感和新型冠状病毒2019-nCoV。

发明内容

本发明的第一个目的是提供一种LAMP联合检测甲型流感病毒、乙型流感病毒及新型冠状病毒的引物组，使用该引物组可联合检测甲型流感病毒、乙型流感病毒及新型冠状病毒，便于区分病人感染了何种病毒。

本发明的第二个目的是提供一种LAMP联合检测甲型流感病毒、乙型流感病毒及新型冠状病毒的试剂盒。

本发明的第三个目的是提供一种LAMP联合检测甲型流感病毒、乙型流感病毒及新型冠状病毒的方法。

为了实现以上目的，本发明采取的技术方案为：