[发明专利]一种肝细胞培养基、培养方法及其用途

权利要求书

1.一种肝细胞培养基，其特征在于，所述肝细胞培养基培养的肝细胞不表达CK19，所述肝细胞培养基包括增殖培养基，所述增殖培养基以增殖培养基总量为基础计，由以下成分组成：

液体基础培养基

半乳糖 0.2 ~ 2 g/L；

胰岛素-转铁蛋白-亚硒酸钠 液体基础培养基体积的0.1%~10%；

脯氨酸 0.1 ~ 10 g/L；

烟酰胺 0.1 ~ 10 g/L；

鸟氨酸 0.01 ~ 1 g/L；

转化生长因子α 0.1~100 ng/mL；

表皮生长因子 0.1~100 ng/mL；

地塞米松 10 nM ~ 10 μM；

Y-27632 0.1~100 μM；

A-83-01 0.01~10 μM；

CHIR99021 0.1~100 μM；

所述肝细胞培养基还包括成熟培养基，所述成熟培养基以成熟培养基的总量为基础计，由以下成分组成：

液体基础培养基

半乳糖 0.2 ~ 2 g/L；

胰岛素-转铁蛋白-亚硒酸钠 液体基础培养基体积的0.1% ~ 10%；

脯氨酸 0.1 ~ 10 g/L；

烟酰胺 0.1 ~ 10 g/L；

鸟氨酸 0.01 ~ 1 g/L；

转化生长因子α 0.1~100 ng/mL；

表皮生长因子 0.1 ~ 100 ng/mL；

地塞米松 10 nM ~ 10 μM；

抑瘤素-M 0.1~100 ng/mL；

腺苷酸环化酶激活剂 0.1 ~100 μM；

所述腺苷酸环化酶激活剂为弗斯可林。

2.根据权利要求1所述的肝细胞培养基，其特征在于，所述弗斯可林的浓度为0.1 μM -100 μM。

3.根据权利要求1所述的肝细胞培养基，其特征在于，所述弗斯可林的浓度为1~50 μM。

4.根据权利要求1所述的肝细胞培养基，其特征在于，所述液体基础培养基为MEM、DMEM、DMEM/F12、RPMI1640、F12中的一种或几种。

5.根据权利要求1所述的肝细胞培养基，其特征在于，还包括以下项中的一种或几种：

所述半乳糖的浓度为1.0 ~ 2.0g/L；

所述脯氨酸的浓度为：0.1 ~ 1.0 g/L；

所述鸟氨酸的浓度为：0.01~0.3 g/L；

所述烟酰胺的浓度为：0.4~0.8 g/L；

所述转化生长因子α的浓度为10~80 ng/mL。