[发明专利]白细胞介素-6的检测试剂、试纸、试剂盒及其应用在审
申请号: | 202011100731.5 | 申请日: | 2020-10-15 |
公开(公告)号: | CN112269024A | 公开(公告)日: | 2021-01-26 |
发明(设计)人: | 徐蕊萍;娄珺;周伟 | 申请(专利权)人: | 上海捷门生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/58;G01N33/558;G01N33/533 |
代理公司: | 上海上谷知识产权代理有限公司 31342 | 代理人: | 蔡继清 |
地址: | 201806 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 白细胞 检测 试剂 试纸 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种白细胞介素-6的检测试剂,其特征在于,所述白细胞介素-6的检测试剂包含标记有白细胞介素-6抗体的羧基修饰时间分辨荧光微球;且所述羧基修饰时间分辨荧光微球通过链霉亲和素和生物素被白细胞介素-6抗体标记。
2.根据权利要求1所述的白细胞介素-6的检测试剂,其特征在于,所述羧基修饰时间分辨荧光微球上连接有含有碳原子的氨基酸。
3.根据权利要求2所述的白细胞介素-6的检测试剂,其特征在于,所述含有碳原子的氨基酸为氨基正己酸。
4.根据权利要求2所述的白细胞介素-6的检测试剂,其特征在于,所述羧基修饰时间分辨荧光微球与所述含有碳原子的氨基酸的质量比为1:16~1:15;
所述羧基修饰时间分辨荧光微球与链霉亲和素的质量比为10:1~12:1;
所述羧基修饰时间分辨荧光微球与白细胞介素-6抗体的质量比为1:1~1:1.5;
所述白细胞介素-6与生物素的质量比为10:1~12:1。
5.一种制备白细胞介素-6的检测试剂的方法,其特征在于,所述方法用于制备权利要求1至4中任一项所述的白细胞介素-6的检测试剂,所述方法包括步骤:
步骤一、在活性剂存在下,将羧基修饰时间分辨荧光微球与链霉亲和素进行偶联反应,从而得到活化的链霉亲和素标记的羧基修饰时间分辨荧光微球;
步骤二、将生物素标记的白细胞介素-6抗体与前述步骤一得到的活化的链霉亲和素标记的羧基修饰时间分辨荧光微球进行偶联反应,从而得到标记有白细胞介素-6抗体的羧基修饰时间分辨荧光微球;
步骤三、封闭剂处理前述步骤二得到的标记有白细胞介素-6抗体的羧基修饰时间分辨荧光微球,从而得到所述白细胞介素-6的检测试剂。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述方法步骤一前还包括步骤:
步骤四、在活性剂存在下,将羧基修饰时间分辨荧光微球与含有碳原子的氨基酸进行偶联反应,从而得到连接有含有碳原子的氨基酸的羧基修饰时间分辨荧光微球。
7.根据权利要求5或6中任一项所述的方法,其特征在于,所述活性剂为含有-N=C=N-结构片段的有机化合物和/或NHS。
8.一种白细胞介素-6的检测试纸,其特征在于,所述检测试纸包括:
底板、固定于所述底板的样品垫、标记垫、层析膜和吸水垫;
所述样品垫、标记垫、层析膜和吸水垫依次排列在底板上且顺次接触;
所述标记垫上喷有第一检测试剂和第一质控试剂;所述第一检测试剂为权利要求1至4任一项所述的检测试剂;所述第一质控试剂包括标记有兔抗鸡IgY抗体;
所述层析膜远离标记垫的一端设置有质控线,所述质控线上固定包被有第二质控试剂,所述第二质控试剂包含兔抗鸡IgY抗体;
所述层析膜靠近标记垫的一端设置有检测线,所述检测线上固定包被有第二检测试剂;所述第二检测试剂包括白细胞介素-6抗体。
9.一种白细胞介素-6的检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包含权利要求8所述的检测试纸。
10.一种白细胞介素-6的检测方法,其特征在于,所述检测方法包括步骤:
步骤a、取待检测样本与样本稀释液混合;
步骤b、将步骤a得到的混合液加至权利要求8所述的检测试纸的样品垫上进行免疫层析反应;
步骤c、检测所述检测试纸上检测线处的荧光值,根据标准曲线得到待检测样本中白细胞介素-6的含量。
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