[发明专利]一种环糊精葡萄糖基转移酶突变体及其应用有效
申请号: | 202011101678.0 | 申请日: | 2020-10-15 |
公开(公告)号: | CN112210544B | 公开(公告)日: | 2022-04-15 |
发明(设计)人: | 吴敬;王蕾;孔德民;宿玲恰 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N9/10 | 分类号: | C12N9/10;C12N15/54;C12P19/18;C12P19/04 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 林娟 |
地址: | 214000 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 环糊精 葡萄 糖基转移酶 突变体 及其 应用 | ||
1.一种环糊精葡萄糖基转移酶突变体,其特征在于,所述环糊精葡萄糖基转移酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.编码权利要求1所述环糊精葡萄糖基转移酶突变体的基因。
3.携带权利要求2所述基因的表达载体。
4.如权利要求3所述的表达载体,其特征在于,所述载体为pGEX质粒、pHY300质粒、pPIC3K质粒、pPIC9K质粒、pHY300PLK质粒、pET质粒或Duet质粒。
5.携带权利要求2所述基因或权利要求3或4所述表达载体的微生物细胞。
6.如权利要求5所述的微生物细胞,其特征在于,所述微生物细胞为细菌或真菌细胞。
7.权利要求1所述的环糊精葡萄糖基转移酶突变体的制备方法,其特征在于,将权利要求5或6所述的微生物细胞接种至发酵培养基中进行发酵,发酵结束后,收集发酵获得的发酵液进行离心,离心结束后,从离心获得的发酵上清液中分离得到权利要求1所述的环糊精葡萄糖基转移酶突变体。
8.一种提高环糊精葡萄糖基转移酶歧化活力与水解活力比值或环糊精葡萄糖基转移酶催化效率的方法,其特征在于,所述方法为将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的环糊精葡萄糖基转移酶的第277位的由亮氨酸突变为甲硫氨酸。
9.一种制备淀粉糖或糖苷化合物的方法,其特征在于,所述方法为将权利要求1所述的环糊精葡萄糖基转移酶突变体或权利要求5或6所述的微生物细胞添加至含有淀粉的反应体系中进行反应。
10.权利要求1所述环糊精葡萄糖基转移酶突变体,或权利要求2所述基因,或权利要求3或4所述的表达载体,或权利要求5或6所述微生物细胞,或权利要求7所述制备方法在(a)~(c)至少一方面的应用:
(a)水解淀粉或水解麦芽糊精;
(b)提高环糊精葡萄糖基转移酶催化效率;
(c)提高环糊精葡萄糖基转移酶歧化活力与水解活力比值。
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