[发明专利]一种L-天门冬氨酸的制备方法

权利要求书

1.一种L-天门冬氨酸的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、以聚丙烯酰胺和角叉菜胶的混合物为载体，将含L-天门冬氨酸酶的大肠杆菌包埋于载体中，得到固定化细胞；所述固定化细胞作为填料填充于交换柱中，得到固定化细胞柱；

S2、使pH值为7的质量百分浓度为20％的富马酸铵水溶液经过所述固定化细胞柱，收集过柱液；

S3、使用顺丁烯二酸调节过柱液的pH值至2.2-2.5，到达L-天门冬氨酸等电点时析出L-天门冬氨酸固体，固液分离，分别收集固体L-天门冬氨酸和母液；

S4、向母液中投入溴化铵和过硫酸铵，得到富马酸铵水溶液；然后再通过向富马酸铵水溶液中投入氨水和富马酸，将溶液调节为pH值为7的质量百分浓度为20％的富马酸铵水溶液。

2.根据权利要求1所述的L-天门冬氨酸的制备方法，其特征在于，步骤S1中，载体中所述聚丙烯酰胺和角叉菜胶的质量比为3:1。

3.根据权利要求1所述的L-天门冬氨酸的制备方法，其特征在于，步骤S1中，大肠杆菌的包埋方法为：1g大肠杆菌细胞与1mL生理盐水混合制成菌悬浮，然后加入质量百分浓度为10-12％的载体溶液并搅拌混匀，制得大肠杆菌细胞质量百分浓度为2-2.5％的混合液，在持续搅拌下将混合液逐滴滴入100mL的0.2mol/L的CaCl₂溶液中，得到包埋颗粒，包埋颗粒继续在0.2mol/L的CaCl₂溶液中浸泡2h，然后过滤、洗涤、抽干，得到固定化细胞。

4.根据权利要求1所述的L-天门冬氨酸的制备方法，其特征在于，步骤S2中，所述固定化细胞柱的柱温为49-51℃，pH为7，富马酸铵水溶液的通柱速度为2L/h。

5.根据权利要求1所述的L-天门冬氨酸的制备方法，其特征在于，步骤S3中，使用离心机进行固液分离，收集固体L-天门冬氨酸、母液和冲洗液，冲洗液合并至母液中。

6.根据权利要求1-5任一项所述的L-天门冬氨酸的制备方法，其特征在于，培养步骤S1中所述的含L-天门冬氨酸酶的大肠杆菌时，使用的发酵培养基的组成为泡敌溶液中含以下质量百分比的各组分：玉米浆1.8-2.2％，硫酸镁0.02％，磷酸二氢钾0.1％，氯化钠0.145％，反丁烯二酸1％，并用氨水调节pH值至7.5。