[发明专利]抗PD-L1抗体和IL-7构成的双功能融合蛋白

说明书

本发明提供了抗PD‑L1抗体和IL‑7构成的双功能融合蛋白；具体地，本发明提供了一种重组双功能融合蛋白，所述重组双功能融合蛋白包含：第一结构单元(D1)；和第二结构单元(D2)；其中，所述第一结构单元为特异性结合PD‑L1蛋白的抗体；所述第二结构单元包括IL‑7，本发明的融合蛋白可以在肿瘤微环境下富集IL‑7细胞因子，在肿瘤微环境内特异性激活免疫系统，可以大大减少毒副作用。

技术领域

本发明属于是生物医药领域，具体地本发明涉及抗PD-L1抗体和IL-7构成的双功能融合蛋白。

背景技术

肿瘤微环境中通常表达免疫抑制性程序性死亡配体1(PD-L1)蛋白较高，PD-L1可以结合免疫细胞(主要是T细胞)表面受体PD-1,从而抑制免疫系统的激活进而促进癌细胞生长。

白细胞介素7(IL-7)是由骨髓和胸腺中的基质细胞分泌的造血生长因子。IL-7刺激多能造血干细胞分化为淋巴祖细胞。它还刺激淋巴谱系中所有细胞(B细胞、T细胞和NK细胞)的增殖。IL-7是一种对B细胞和T细胞的发育很重要的细胞因子。该细胞因子和肝细胞生长因子(HGF)形成异二聚体，其作为前祖B细胞生长刺激因子起作用。该细胞因子可以由肠上皮细胞和上皮杯状细胞局部产生，并且可以作为肠粘膜淋巴细胞的调节因子。

尽管PD-1/PD-L1抗体可以对多种肿瘤起到前所未有的疗效，至今只对约20％的人有效。

癌症患者中IL-7的人体研究表明，施用该细胞因子可以瞬时破坏CD8+和CD4+T细胞的稳态，同时CD4+CD25+Foxp3+T调节细胞的百分比相应降低。然而，没有观察到事实上的癌症消退。

因此，本领域迫切需要开发一种能够显著增加IL-7细胞因子的半衰期，减少临床剂量，降低毒副作用的药物。

发明内容

本发明的目的在于提供一种能够显著增加IL-7细胞因子的半衰期，减少临床剂量，降低毒副作用的药物。

本发明的第一方面，提供了一种重组双功能融合蛋白，所述重组双功能融合蛋白包含：

第一结构单元(D1)；和

第二结构单元(D2)；

其中，所述第一结构单元为特异性结合PD-L1蛋白的抗体；

所述第二结构单元包括IL-7，

并且所述第二结构单元与所述第一结构单元的重链恒定区的末端相连。

在另一优选例中，所述的抗体包括：动物源抗体(如鼠源抗体)、嵌合抗体、人源化抗体。

在另一优选例中，所述的抗体为双链抗体、或单链抗体。

在另一优选例中，所述的抗体为单克隆抗体。

在另一优选例中，所述的抗体是部分或全人源化的单克隆抗体。

在另一优选例中，所述D1和D2之间通过连接肽相连。

在另一优选例中，所述连接肽具有如下结构：-(Gly-Gly-Gly-Ser)n-，其中，n为1-5，较佳地，1-3。

在另一优选例中，所述双功能融合蛋白(单体)从N端到C端具有式I所示的结构：

其中，

T1为IL-7；

L1为任选的连接元件；

VL代表抗PD-L1抗体的轻链可变区；

CL代表抗PD-L1抗体的轻链恒定区；

VH代表抗PD-L1抗体的重链可变区；