[发明专利]利用猪小肠粘膜低盐制备粗品肝素钠的方法有效
申请号: | 202011102149.2 | 申请日: | 2020-10-15 |
公开(公告)号: | CN112159486B | 公开(公告)日: | 2023-05-05 |
发明(设计)人: | 张朝阳;乔康康;崔洁;高秀强;冯朝;王志华;高飞 | 申请(专利权)人: | 河北常山凯库得生物技术有限公司 |
主分类号: | C08B37/10 | 分类号: | C08B37/10 |
代理公司: | 北京中睿智恒知识产权代理事务所(普通合伙) 16025 | 代理人: | 邓大为 |
地址: | 050800 河北省石家庄*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 利用 小肠 粘膜 低盐 制备 肝素钠 方法 | ||
1.一种利用猪小肠粘膜低盐制备粗品肝素钠的方法,其特征在于:包括下列步骤:
a、低盐复合酶解:准备猪小肠的粘膜溶液,添加饱和肠衣盐水,调节所述粘膜溶液的盐浓度至质量分数0.88~0.92%、调节所述粘膜溶液的pH至7.0~8.0;升温至50~55℃,添加复合酶进行酶解,得到酶解液;所述复合酶为2709碱性蛋白酶和胰酶;酶解的条件为:首先保温2~3h,其次升温至80~85℃,再次保温20~30min,最后降温至50~55℃;所述复合酶的添加量为所述猪小肠的粘膜溶液质量的0.1~0.2%;
b、酶解液浓缩:将所述酶解液浓缩,得到浓缩液,所述浓缩液的体积为所述酶解液的1/10;
c、离子交换:将所述浓缩液进行离子交换,得到粗品肝素钠洗脱液;
d、醇淀烘干:将所述粗品肝素钠洗脱液进行醇淀,后烘干醇淀的沉淀物,即得粗品肝素钠;
所述2709碱性蛋白酶和所述胰酶的质量比为2∶1。
2.根据权利要求1所述的猪小肠粘膜低盐制备粗品肝素钠的方法,其特征在于:步骤b中,酶解液浓缩的步骤包括:
b1、将所述酶解液进行离心,离心机转速为5000r/min,流量3~6m3/h,连续运转;
b2、将离心后的上清液经500nm陶瓷膜过滤;
b3、将过滤后的上清液经纳滤膜浓缩,所述纳滤膜的截留分子量为大于300~400道尔顿,操作压力为1.5Mpa,操作温度为35℃。
3.根据权利要求1所述的猪小肠粘膜低盐制备粗品肝素钠的方法,其特征在于:步骤c中,离子交换的步骤包括:
c1、将所述浓缩液转入装有阴离子交换树脂的离子交换柱进行肝素的吸附,吸附时间为10h;
c2、用质量分数2%的NaCl溶液洗涤所述离子交换柱;
c3、用质量分数20%的NaCl溶液洗脱所述离子交换柱,得到粗品肝素钠洗脱液。
4.根据权利要求1所述的猪小肠粘膜低盐制备粗品肝素钠的方法,其特征在于:步骤d中,醇淀烘干的步骤包括:
d1、向所述粗品肝素钠洗脱液中加入90~95°食品级酒精,并调节酒精度至40~50°进行醇沉,醇淀时间为8~12h;
d2、分离出醇淀的沉淀物;
d3、将所述醇淀的沉淀物于80℃下烘干8h,得到粗品肝素钠。
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