[发明专利]一种三(羟甲基)甲基甘氨酸的制备方法

说明书

本发明提供一种三(羟甲基)甲基甘氨酸的制备方法，包括如下步骤：将21g氯乙酸钠和20g三羟甲基氨基甲烷置于三口瓶中，加入200g甲醇，加热至回流；保持所述三口瓶内的PH值在8‑10之间，直至反应完成；将所述三口瓶内的溶液冷却后，在冰浴下缓慢加入浓硫酸至溶液的PH值为4；缓慢加热至回流1小时，趁热过滤，将滤液冷冻结晶，过滤后得到第一滤饼；将甲醇回收一半后再次冷冻结晶，过滤后得到第二滤饼；将所述第一滤饼和所述第二滤饼合并烘干得到白色固体的三(羟甲基)甲基甘氨酸。本发明提供的三(羟甲基)甲基甘氨酸的制备方法收率高。

技术领域

本发明涉及生物制药技术领域，具体涉及一种三(羟甲基)甲基甘氨酸的制备方法。

背景技术

Tricine，中文名为三(羟甲基)甲基甘氨酸，是一种两性离子缓冲试剂，结构类似于三羟甲基氨基甲烷，但是高浓度具有比三羟甲基氨基甲烷更弱的抑制性，也是Good’s缓冲试剂之一，最初开发用于提供叶绿体反应的缓冲体系。Tricine的有效pH缓冲范围为7.4-8.8，pKa＝8.1(25℃)，常用做电泳缓冲液，以及用来重悬细胞沉淀。Tricine具有低负电荷和高离子强度的特性，非常适用于电泳分离1～100kDa的低分子量蛋白。基于萤火虫荧光素酶的ATP分析实验中，比较常见的10种缓冲液，Tricine(25mM) 表现出最好的检测效果。另外，在自由基诱导的膜损伤实验中，Tricine还是一种有效的羟自由基清除剂。

相关技术中，三(羟甲基)甲基甘氨酸的制备通常在水溶液中进行，作为原材料的氯乙酸钠在有水的环境中容易受热水解再聚合生成复杂的副产物，会提高结晶提纯的难度，使三(羟甲基)甲基甘氨酸的收率不高。

因此，实有必要提供一种新的三(羟甲基)甲基甘氨酸的制备方法以解决上述问题。

发明内容

本发明的目的是克服上述技术问题，提供一种收率高的三(羟甲基)甲基甘氨酸的制备方法。

为了实现上述目的，本发明提供一种三(羟甲基)甲基甘氨酸的制备方法，包括如下步骤：

S1：将21g氯乙酸钠和20g三羟甲基氨基甲烷置于三口瓶中，加入200g 甲醇，加热至回流；

S2：保持所述三口瓶内的pH 值在8-10之间，直至反应完成；

S3：将所述三口瓶内的溶液冷却后，在冰浴下缓慢加入浓硫酸至溶液的pH 值为4；

S4：缓慢加热至回流1小时，趁热过滤，将滤液冷冻结晶，过滤后得到第一滤饼；

S5：将甲醇回收一半后再次冷冻结晶，过滤后得到第二滤饼；

S6：将所述第一滤饼和所述第二滤饼合并烘干得到白色固体的三(羟甲基)甲基甘氨酸。

优选的，所述三口瓶为500ml的三口瓶。

优选的，所述步骤S2具体为：每隔半小时取样检测三口瓶内溶液的pH 值，pH 值小于8时，加入少量20％的甲醇钠甲醇溶液使pH 值保持在 8-10之间，多次加入所述甲醇钠甲醇溶液直到pH 值不再下降。

与相关技术相比，本发明提供的一种三(羟甲基)甲基甘氨酸的制备方法中采用甲醇作溶剂且用甲醇钠做碱，避免了原材料氯乙酸钠在有水的环境中受热水解再聚合生成复杂的副产物，使结晶提纯更加简便，并且操作简便，收率高。

具体实施方式

下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明提供一种三(羟甲基)甲基甘氨酸的制备方法，包括如下步骤：