[发明专利]一种极低频电磁场诱导的促神经细胞生长和交联的方法在审
申请号: | 202011111309.X | 申请日: | 2020-10-16 |
公开(公告)号: | CN112210535A | 公开(公告)日: | 2021-01-12 |
发明(设计)人: | 章幼玉;程舜;李文;柳清伙 | 申请(专利权)人: | 厦门大学;厦门大学深圳研究院 |
主分类号: | C12N5/079 | 分类号: | C12N5/079;C12N13/00 |
代理公司: | 北京中济纬天专利代理有限公司 11429 | 代理人: | 郑翰伟 |
地址: | 361005 *** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 低频 电磁场 诱导 神经细胞 生长 交联 方法 | ||
1.一种极低频电磁场诱导的促神经细胞生长和交联的方法,其特征在于,其方法所采用的技术方案是:利用一种极低频电磁场装置对细胞进行刺激,极低频电磁场诱导的促神经细胞生长和交联的建立方法包括如下步骤:
步骤(1):搭建一种刺激神经细胞的极低频电磁场发生仪,包括信号发生器、功率放大器以及密绕螺线管,所述的密绕螺线管产生的电磁场强度为1mT;
步骤(2):密绕螺线管接收信号发生器发出的脉冲信号,产生相应波形的电磁场;
步骤(3):所述的信号发生器发出的信号频率是50Hz、电流为0.3A;
步骤(4):所述的功率放大器放大倍数是10倍;
步骤(5):培养SH-SY5Y神经细胞至对数期备用;
步骤(6):将所述对数期SH-SY5Y神经细胞分成若干组,分别是对照组细胞和实验组细胞;
步骤(7):所述极低频电磁场刺激SH-SY5Y神经细胞,在细胞培养期间,用极低频脉冲电磁场刺激SH-SY5Y神经细胞,信号频率为50Hz,磁感应强度为1mT;
步骤(8):分别取上述步骤(7)电磁场刺激后细胞进行细胞活性实验、细胞增殖实验和细胞分化实验,以检测刺激后细胞的活性大小、增殖速度和分化程度。
2.根据权利要求1所述一种极低频电磁场诱导的促神经细胞生长和交联的方法,其特征在于,所述步骤(1)具体包括:将脉冲信号发生器的信号输出端与功率放大器的输入端相连,通过功率放大器放大脉冲信号发生器的输出电流,将功率放大器的输出端与密绕螺线管相连。
3.根据权利要求1所述一种极低频电磁场诱导的促神经细胞生长和交联的方法,其特征在于,所述步骤(3)具体包括:将脉冲信号发生器的信号频率设置为50Hz、输出电流为0.3A,脉冲电磁场输出频率为50Hz、电流强度为0.3A的脉冲波形。
4.根据权利要求1所述的一种极低频电磁场诱导的促神经细胞生长和交联的方法的分子检测方法,其特征在于,所述步骤(4)具体包括:功率放大器输入端接收脉冲信号发生器传送过来的信号,将功率放大器的放大倍数调为10倍,功率放大器将接收来的信号放大10倍后通过输出端输出。
5.如权利要求1所述一种极低频电磁场诱导的促神经细胞生长和交联的方法的分子检测方法,其特征在于,所述步骤(5)具体包括:密绕螺线管产生频率为50Hz、磁场强度为1mT的极低频的电磁场。
6.如权利要求1所述一种极低频电磁场诱导的促神经细胞生长和交联的方法的分子检测方法,其特征在于,所述步骤(7)具体包括:将所述对数期SH-SY5Y神经细胞用0.25%胰酶消化、1000rpm,3分钟离心3min,收集细胞,正常DMEM培养液重悬,并将细胞密度调整为大约2×106细胞/毫升;
将所述调整好密度的细胞分成6组,分别为对照组和实验组,接种于培养皿中,每组设3个平行样本,置于37℃培养箱中,培养24h后弃去旧培养基。
7.如权利要求1所述一种极低频电磁场诱导的促神经细胞生长和交联的方法的分子检测方法,其特征在于,所述步骤(8)具体包括:取上述步骤(7)中实验组细胞和对照组细胞,用极低频电磁场发生仪产生的频率50Hz、磁场强度为1mT的电磁场刺激三组实验组细胞2h;观察细胞活性、增殖和分化情况。
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