[发明专利]一种心肌肌钙蛋白I检测方法和试剂盒

权利要求书

1.一种心肌肌钙蛋白I检测试剂盒，其特征在于，其包括用于检测心肌肌钙蛋白I的第一抗体和第二抗体，其中，第一抗体结合心肌肌钙蛋白I的第27-40位氨基酸片段；第二抗体结合心肌肌钙蛋白CTNI-CTNC复合物。

2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，第一抗体为标记抗体时第二抗体为包被抗体；或第二抗体为标记抗体时第一抗体为包被抗体。

3.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒进一步包括检测心肌肌钙蛋白I的第三抗体，所述第三抗体结合心肌肌钙蛋白I的第83-93位氨基酸片段；

例如用于配对的抗体分为第一组抗体和第二组抗体，其中第一组抗体和第二组抗体选自下组：

1)第一组抗体包括第一抗体，并且第二组抗体包括第二抗体和第三抗体；

2)第一组抗体包括第二抗体，并且第二组抗体包括第一抗体和第三抗体；

3)第一组抗体包括第三抗体，并且第二组抗体包括第一抗体和第二抗体；

优选地，第一组抗体为标记抗体，第二组抗体为包被抗体。

4.如权利要求1-3任一项所述的试剂盒，其特征在于，其中所述抗体的反应性为ELISA评价OD₄₀₅≥0.5。

5.如权利要求1-4任一项所述的试剂盒，其特征在于，其中所述标记抗体用可检测标记物和/或结合配偶体标记，可检测标记物例如金属粒子，荧光标记，发色团标记，电子致密标记，化学发光标记，放射性标记，或酶标记；例如可以是罗丹明，荧光素，荧光微球，胶体金，吖啶酯，荧光素酶，辣根过氧化物酶，碱性磷酸酶，β-半乳糖苷酶，葡糖淀粉酶，溶菌酶，糖氧化酶，葡萄糖氧化酶，半乳糖氧化酶或葡萄糖-6-磷酸脱氢酶标记；结合配偶体例如是生物素/抗生物素蛋白，生物素/链霉抗生物素蛋白；例如标记抗体通过结合配偶体与可检测标记物进行标记。

6.如权利要求1-5任一项所述的试剂盒，其特征在于，其中所述包被抗体连接至固相和/或结合配偶体，固相例如是磁性颗粒，胶乳粒子、微量滴定板、硝酸纤维素膜或微流控芯片；结合配偶体例如是生物素/抗生物素蛋白，生物素/链霉抗生物素蛋白；例如包被抗体通过结合配偶体与固相进行连接。

7.检测心肌肌钙蛋白I的抗体组合，其特征在于，包括第一抗体和第二抗体；任选地，还包括第三抗体；其中，第一抗体、第二抗体、第三抗体根据权利要求1-6中任一项所定义。

8.如权利要求7所述的抗体组合在制备检测心肌肌钙蛋白I的试剂盒中的用途。

9.如权利要求8所述的用途，其特征在于，其中所述试剂盒用于1)对心肌肌钙蛋白含量进行动态检测，例如用于进行实时监测，和/或2)诊断早期急性心肌损伤，包括例如排除或预测早期急性心肌损伤。

10.一种制备权利要求7所述的抗体组合的方法，其特征在于，所述方法包括：

1)使用包含选自下述氨基酸片段1-2或蛋白质作为抗原或半抗原免疫动物：

片段1：心肌肌钙蛋白I氨基酸片段27-40；

片段2：心肌肌钙蛋白I氨基酸片段83-93；

蛋白质1：心肌肌钙蛋白CTNI-CTNC复合物；和

2)从所述动物获得分别结合所述片段1-2和蛋白质1的抗体。