[发明专利]一种滇北球花报春人工高效繁殖的方法

权利要求书

1.一种滇北球花报春人工高效繁殖的方法，其特征在于，包括将消毒灭菌处理后的叶片外植体经愈伤组织诱导、丛生芽发生同步诱导、丛生芽增殖、不定根诱导和驯化移栽过程，具体包括如下步骤：

步骤1：外植体的获取

选择生长势好、无病虫害、无畸形的健壮植株，取其当年生叶片；

步骤2：消毒处理

将步骤1获取的叶片进行消毒处理；

步骤3：愈伤组织诱导和丛生芽发生培养

将经过步骤2消毒灭菌好的叶片接入培养基A中，控制光照度、温度、光照时间的条件下进行愈伤组织诱导和丛生芽发生；

步骤4：丛生芽增殖培养

将步骤3中培养的丛生芽转入新鲜的培养基A中，控制光照度、温度、光照时间的条件下进行丛生芽增殖培养；

步骤5：

取步骤4丛芽中的健壮主苗接种于下列培养基B中，控制光照度、温度、光照时间的条件下获得苗壮根粗的生根苗；

步骤6：炼苗和移栽。

2.根据权利要求1所述的一种滇北球花报春人工高效繁殖的方法，其特征在于，步骤1中所述叶片进行消毒处理的方法为：

流水洗净后用质量比为10％洗衣粉溶液浸泡5min，流水冲洗30min后置于超净工作台中；

用体积比75％乙醇溶液浸泡3-5s，然后用质量比为0.1％的升汞水溶液消毒5min，期间不断摇晃瓶身以达到最佳灭菌效果，最后无菌水冲洗5次，每次不低于3min，置于滤纸上吸干残留无菌水，最终得到消毒灭菌处理的外植体。

3.根据权利要求1所述的一种滇北球花报春人工高效繁殖的方法，其特征在于，步骤3中和步骤4中，所述A培养基包括以下原料：

4.根据权利要求1所述的一种滇北球花报春人工高效繁殖的方法，其特征在于，所述A培养基的pH值为5.6-5.8。

5.根据权利要求1所述的一种滇北球花报春人工高效繁殖的方法，其特征在于，所述B培养基，包括以下原料：

1/2MS培养液

蔗糖 15000mg/L

琼脂粉 4800mg/L。

6.根据权利要求1所述的一种滇北球花报春人工高效繁殖的方法，其特征在于，所述B培养基的pH值为5.6-5.8。

7.根据权利要求1所述的一种滇北球花报春人工高效繁殖的方法，其特征在于，步骤6中，炼苗和移栽的方法如下：

取步骤5的生根苗，连培养瓶一起置于室温下炼苗3d，打开瓶盖露苗2d，从培养基中取出幼苗，将残留培养基清洗干净，放入多菌灵溶液中浸泡3-5min后，移栽至消毒后的腐殖质中保温保湿培养，即得移栽苗。

8.根据权利要求1所述的一种滇北球花报春人工高效繁殖的方法，其特征在于，步骤3-步骤5中，培养条件：在光照度1800-2300lx，光照时间8-10h/d，温度控制在20±1℃。