[发明专利]一种滇北球花报春人工高效繁殖的方法

说明书

本发明公开了一种滇北球花报春人工高效繁殖的方法，包括将消毒灭菌处理后的滇北球花报春叶片外植体接种于培养基A中培养，在光照度1800‑2300lx，光照时间8h/d，温度控制在20±1℃的条件下进行愈伤组织诱导和丛芽发生培养；30d后将诱导出的丛生芽转接于新鲜的A培养基中培养，30d后不定芽增殖系数达20.00左右。待增殖丛生芽高5‑8cm时，单苗接入培养基B中培养25‑30d后获得苗壮根粗的生根苗，然后将该生根苗移栽。本发明成本低、周期短、试管苗质量和成活率高，为保护野生资源、优质种苗繁育提供了技术支撑，可在短时间内生产基因型背景一致的优良种苗。

技术领域

本发明涉及中草药繁殖技术领域，具体为一种滇北球花报春人工高效繁殖的方法。

背景技术

滇北球花报春(Primula denticulata)为报春花科(Primulaceae)报春花属(Primula)多年生草本，滇北球花报春花葶通常较粗壮，长达叶丛的6倍以上，花冠亦稍大，分布区与原亚种不连接。花期3-4月，果期4月。产于云南，四川西部等地。生于山坡草地和灌丛中，海拔1500-3000米。

滇北球花报春为野洋参的基原植物，又名米伞花(贵州民间药物)、报春花(云南中草药)，以其根入药，具有补虚，消疳，通乳的功效。主治虚劳咳嗽，病后体虚，小儿疳积，乳汁不下等症；在《生草药性备要》、《贵州草药》、《全国中草药汇编》中均指出其具有行气血、消肿毒、止痛功效，主治胃痛、腹痛、痛风、骨折、跌打损伤、痈疖肿痛、皮肤溃疡等症。

近年来，随着人们对它的需求，加上野外生境的破坏，滇北球花报春资源锐减，严重限制了对其研究开发工作的进行。滇北球花报春通常以其种子为繁殖单位。但种子萌发率低，实生苗生长缓慢且生物量较小、后代变异大，并受到萌发季节的限制，难以进行规模化、标准化(基因型背景一致)种植和高药效品种的大面积推广。因此，需要寻求一种新的成本低、时间短、质量和成活率高，且能将优良性状固定下来的高效人工繁殖方法来扩大滇北球花报春种苗的繁殖量，进行其高品质种苗的工厂化生产，以满足种植需求。

发明内容

针对以上问题，本发明提供了一种滇北球花报春人工高效繁殖的方法，以解决滇北球花报春通常以其种子为繁殖单位，存在萌发率低，实生苗生长缓慢且生物量较小、后代变异大，并受到萌发季节的限制，难以进行规模化、标准化种植，高药效品种难以大面积推广的问题。

根据本发明的目的，本发明提供如下技术方案：

一种滇北球花报春人工高效繁殖的方法，包括将消毒灭菌处理后的叶片外植体经愈伤组织诱导、丛生芽发生同步诱导、丛生芽增殖、不定根诱导和驯化移栽过程，具体包括如下步骤：

步骤1：外植体的获取

选择生长势好、无病虫害、无畸形的健壮植株，取其当年生叶片；

步骤2：消毒处理

将步骤1获取的叶片进行消毒处理；

步骤3：愈伤组织诱导和丛生芽发生培养

将经过步骤2消毒灭菌好的叶片接入培养基A中，控制光照度、温度、光照时间的条件下进行愈伤组织诱导和丛生芽发生；

步骤4：丛生芽增殖培养

将步骤3中培养的丛生芽转入新鲜的培养基A中，控制光照度、温度、光照时间的条件下进行丛生芽增殖培养；

步骤5：

取步骤4丛芽中的健壮主苗接种于下列培养基B中，控制光照度、温度、光照时间的条件下获得苗壮根粗的生根苗；

步骤6：炼苗和移栽。

进一步地，步骤1中所述叶片进行消毒处理的方法为：