[发明专利]7α-羟基类固醇脱氢酶突变体St-2-2 △C10及其应用有效
申请号: | 202011118840.X | 申请日: | 2020-10-19 |
公开(公告)号: | CN112175918B | 公开(公告)日: | 2023-01-24 |
发明(设计)人: | 祝连彩;周明海;唐茁洲;敖芳林;王伯初;潘银平;唐士金 | 申请(专利权)人: | 重庆大学 |
主分类号: | C12N9/04 | 分类号: | C12N9/04;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C12P33/02;C12R1/19 |
代理公司: | 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司 11129 | 代理人: | 吕小琴 |
地址: | 400040 重庆市沙坪坝*** | 国省代码: | 重庆;50 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 羟基 类固醇 脱氢酶 突变体 st c10 及其 应用 | ||
1.一种7α-羟基类固醇脱氢酶突变体,其特征在于:其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示,是由氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的7α-羟基类固醇脱氢酶的C-端截短10个氨基酸所得。
2.编码权利要求1所述的7α-羟基类固醇脱氢酶突变体的基因。
3.根据权利要求2所述的基因,其特征在于:其核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。
4.包含权利要求2或3所述基因的表达盒、载体或重组菌。
5.权利要求1所述的7α-羟基类固醇脱氢酶突变体的制备方法,其特征在于:包括如下步骤:合成所述7α-羟基类固醇脱氢酶突变体的编码基因,构建表达载体,转化蛋白表达宿主菌,诱导蛋白表达并纯化。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于:所述7α-羟基类固醇脱氢酶突变体的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。
7.一种催化剂,其特征在于:其有效成分包含权利要求1所述的7α-羟基类固醇脱氢酶突变体。
8.权利要求1所述的7α-羟基类固醇脱氢酶突变体或权利要求7所述的催化剂在羰基不对称还原反应中的应用。
9.一种制备TUDCA的方法,其特征在于:以鸡胆粉为原料,使用权利要求1所述的7α-羟基类固醇脱氢酶突变体或权利要求7所述的催化剂进行催化反应,得到TUDCA,不产副产物TUCA。
10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于:所述催化反应在25℃条件下,在pH 9.0,50mM Gly-NaOH中进行。
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