[发明专利]一种区分中蜂蜂蜜与意蜂蜂蜜的方法

权利要求书

1.一种中蜂蜂蜜与意蜂蜂蜜的区分鉴别方法，所述区分鉴别方法包括以下步骤：

(1)称取检测量的待测蜂蜜样品；

(2)使用HS-SPME-GC-MS对待测蜂蜜中挥发性碳氢化合物进行检测，得到检测谱图并依据谱图对待测蜂蜜样品中的顺-9-二十三烯(Cis-9-Tricosene，C9T)及其异构体、顺-9-二十五烯(Cis-9-Pentacosene，C9P)及其异构体进行定量；

(3)根据蜂蜜中C9T和C9P及其异构体的含量和C9T和C9P及其异构体的比例，鉴别中蜂蜂蜜和意蜂蜂蜜；

所述的C9T的异构体为反-9-二十三烯(Iso-9-Tricosene)，所述的C9P的异构体为反-9-二十五烯(Iso-9-Pentacosene)；

步骤(2)中所述的HS-SPME-GC-MS的方法中，

1)HS-SPME条件为：

固相微萃取纤维为：30μm聚二甲基硅氧烷；

平衡时间：5-30min；

萃取温度：40-80℃；

萃取时间：5-60min；

解析时间：1-5min；

2)GC条件为：

色谱柱：DB-5MS毛细管柱；

程序升温：初始温度50℃，保持1min；然后以40℃/min升至250℃；然后以5℃/min升至300℃，保持9min；

柱流量：1.5mL/min；

进样口温度：280℃；

载气：高纯氦气；

3)MS条件为：

离子源为EI源；

传输线温度为300℃；

离子源温度为230℃；

四极杆温度为150℃；

溶剂延迟时间为5min；

检测方式：全扫描模式+选择离子扫描模式，

Scan扫描质量数范围为：40-500m/z，SIM扫描各化合物的定量离子如下：

检测目标物为C9T，定量离子m/z＝322.3，保留时间：8.27min，保留时间允许的偏差应小于0.3min，

检测目标物为C9P，定量离子m/z＝350.4，保留时间：9.45min，保留时间允许的偏差应小于0.3min；

步骤(3)所述的根据蜂蜜中C9T和C9P及其异构体的含量和C9T和C9P及其异构体的比例，鉴别中蜂蜂蜜和意蜂蜂蜜的方法为，当待测样品中：

1)C9T≤20mg/kg，RT≤3.0，且C9P≤30mg/kg，RP≤4.0时，判定样品为中蜂蜂蜜；

2)当C9T20mg/kg，RT3.0，且C9P30mg/kg，RP4.0时，判定样品为意蜂蜂蜜；

RT为C9T与其异构体(Iso-9-Tricosene)峰面积的比值；

RP为C9P与其异构体(Iso-9-Pentacosene)峰面积的比值。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，

步骤(1)中所述的蜂蜜样品为市售样品，检测量为1-5g。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，萃取温度为60℃、萃取时间为30min。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，

步骤(2)定量方法为：以C9T、C9P的标准物质绘制标准曲线，随后通过计算检测结果的峰面积，对C9T及其异构体、C9P及其异构体的含量进行定量。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，

步骤(2)定量方法为：以C9T和C9P的添加浓度X为横坐标，以HS-SPME-GC-MS得出的C9T和C9P的定量离子的色谱峰面积Y为纵坐标，得到标准曲线，用于C9T和C9P的准确定量，标准曲线拟合方程为：

C9T：Y＝264.5X+778.5，线性相关系数R2＝0.9967；

C9P：Y＝272.4X+707.2，线性相关系数R2＝0.9980。

6.C9T及其异构体、C9P及其异构体在制备检测中蜂蜂蜜和意蜂蜂蜜的检测试剂中的应用。