[发明专利]适用于天目地黄的qRT-PCR内参基因及其应用在审
| 申请号： | 202011127365.2 | 申请日： | 2020-10-20 |
| 公开（公告）号： | CN112210618A | 公开（公告）日： | 2021-01-12 |
| 发明（设计）人： | 王丰青;左鑫;李铭铭;李欣容;苗春妍;杨旭;孙瑞斌;杜家方;周艳;洪利亚;张重义 | 申请（专利权）人： | 河南农业大学;焦作市玖道种苗繁育有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12N15/11;C12N15/29 |
| 代理公司： | 郑州睿信知识产权代理有限公司 41119 | 代理人： | 牛爱周 |
| 地址： | 450046 河南省郑*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 适用于 地黄 qrt pcr 内参 基因 及其 应用 | ||
【权利要求书】：
1.适用于天目地黄的qRT-PCR内参基因，其特征在于，所述内参基因为RcTIP41基因和/或Rc18S基因，所述RcTIP41基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.1所示；所述Rc18S基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.2所示。
2.RcTIP41基因和/或Rc18S基因作为内参基因在qRT-PCR检测天目地黄基因转录表达水平中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，采用核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示的正向引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示的反向引物对RcTIP41基因进行特异性扩增；采用核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示的正向引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示的反向引物对Rc18S基因进行特异性扩增。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述qRT-PCR的反应体系为25μl，包含Premix Ex Tap II 12.5μl，正向引物和反向引物分别1μl，cDNA 1μl，ddH2O补足25μl，其中cDNA由RNA反转录得到。
5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述qRT-PCR的反应程序为95℃30s；95℃5s，60℃30s，40个循环。
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