[发明专利]化合物myrothecine H和I及其制备方法和应用

权利要求书

1.式(I)所示的化合物myrothecine H或式(II)所示的化合物myrothecine I，

2.一种权利要求1所述的化合物myrothecine H和myrothecine I的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

a.制备广藿香内生真菌Paramyrothecium roridum A697的发酵培养物，分离菌丝体和发酵液，发酵液用乙酸乙酯萃取，萃取液经浓缩后得浸膏；

b.浸膏经C₁₈反相柱层析，用甲醇-水作为洗脱剂，从体积比60:40至100:0梯度洗脱，收集甲醇-水体积比为70:30洗脱下来的馏分Fr3，Fr3经凝胶柱层析Sephadex LH-20，以氯仿-甲醇体积比1:3作为洗脱剂洗脱，收集流份，然后用TLC薄层层析进行合并，收集TLC薄层层析以正己烷:乙酸乙酯＝1:1v/v展开得Rf＝0.3-0.5的组分Fr3.3，组分Fr3.3再经硅胶柱层析，用正己烷-乙酸乙酯做洗脱剂，从体积比5:1，2:1，1:1，1:2，1:3进行梯度洗脱，收集流份，然后用TLC薄层层析进行合并，收集经TLC薄层层析以正己烷:乙酸乙酯＝1:1v/v展开得Rf＝0.4-0.5的组分Fr3.1.1，组分Fr3.1.1经进一步的半制备HPLC，获得化合物myrothecine H和myrothecine I；

所述的步骤a的制备广藿香内生真菌Paramyrothecium roridum A697的发酵培养物，包括以下步骤：挑取广藿香内生真菌Paramyrothecium roridum A697的菌丝接种于马铃薯葡萄糖液体培养基中，在28℃、120r/min条件下培养5天，制得种子液；然后将种子液按10％的接种量接种于马铃薯葡萄糖液体培养基中，28℃、120r/min条件下培养7天，制得Paramyrothecium roridum A697的发酵培养物；所述的马铃薯葡萄糖液体培养基，每升是通过以下方法配制的：用500mL的纯水煮200g的马铃薯，煮沸20min，过滤得马铃薯汁；再加入葡萄糖20g、KH₂PO₄ 3g、MgSO₄ 1.5g、维生素B1 10mg，用水补足至1000mL。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述的组分Fr3.1.1经进一步的半制备HPLC，获得化合物myrothecine H和myrothecine I是使用YMCpack ODS-A/AQ柱，流动相为体积比50:50的乙腈/水，流速为3mL/min，得到化合物myrothecine H，t_R 12.6min和myrothecine I，t_R 13.4min。

4.权利要求1中的化合物myrothecine H和/或myrothecine I或其药用盐在制备抗肿瘤药物中的应用，所述的抗肿瘤药物为抗肝癌、乳腺癌、神经胶质瘤或大细胞肺癌的药物。

5.一种抗肿瘤药物，其特征在于，包含有效量的作为活性成分的权利要求1所述的化合物myrothecine H和/或myrothecine I或其药用盐，和药学上可接受的载体，所述的抗肿瘤药物为抗肝癌、乳腺癌、神经胶质瘤或大细胞肺癌的药物。

6.广藿香内生真菌Paramyrothecium roridum A697在制备权利要求1所述的化合物myrothecine H和myrothecine I中的应用。